Avalia??o do efeito do composto tipo heparina isolado do caranguejo Chaceon fenneri na hemostasia e na morte celular

• Main Author: Araujo, Raquel Helen Brito de
• Other Authors: CPF:33615217420
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal do Rio Grande do Norte 2014
• Subjects: Compostos tipo heparina; Anticoagulante; Risco hemorr?gico; C?lulas tumorais; Citotoxicidade; Heparin-like compound; Anticoagulant; Hemorrhagic risk; Tumoral cells; Cytotoxic activity; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA
• Online Access: http://repositorio.ufrn.br:8080/jspui/handle/123456789/12594

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RaquelHBA_DISSERT.pdf: 1772501 bytes, checksum: 51cea5d11ac1524fb197874e85c15f64 (MD5) Previous issue date: 2012-07-20 === Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior === Heparin is a pharmaceutical animal widely used in medicine due to its potent anticoagulant effect. Furthermore, it has the ability to inhibit the proliferation, invasion and adhesion of cancer cells to vascular endothelium. However, its clinical applicability can be compromised by side effects such as bleeding. Thus, the search for natural compounds with low bleeding risk and possible therapeutic applicability has been targeted by several research groups. From this perspective, this study aims to evaluate the hemorrhagic and anticoagulant activities and citotoxic effect for different tumor cell lines (HeLa, B16-F10, HepG2, HS-5,) and fibroblast cells (3T3) of the Heparin-like from the crab Chaceon fenneri (HEP-like). The HEP-like was purified after proteolysis, ion-exchange chromatography, fractionation with acetone and characterized by electrophoresis (agarose gel) and enzymatic degradation. Hep-like showed eletroforetic behavior similar to mammalian heparin, and high trisulfated /Nacetylated disaccharides ratio. In addition, HEP-like presented low in vitro anticoagulant activity using aPTT and a minor hemorrhagic effect when compared to mammalian heparin. Furthermore, the HEP-like showed significant cytotoxic effect (p<0.001) on HeLa, HepG2 and B16-F10 tumor cells with IC50 values of 1000 ug/mL, after incubation for 72 hours. To assess the influence of heparin-like on the cell cycle in HeLa cells, analysis was performed by flow cytometry. The results of this analysis showed that HEP-like influence on the cell cycle increasing S phase and decreasing phase G2. Thus, these properties of HEP-like make these compounds potential therapeutic agents === A heparina ? um agente farmac?utico amplamente utilizado em medicina devido ao seu potente efeito anticoagulante. Al?m disso, tem a capacidade de inibir a prolifera??o, invas?o e ades?o de c?lulas cancerosas ao endot?lio vascular. No entanto, a sua aplicabilidade cl?nica pode ser comprometida por efeitos secund?rios tais como hemorragia. Assim, a busca de compostos naturais com baixo risco hemorr?gico e poss?vel aplicabilidade terap?utica tem sido alvo de v?rios grupos de pesquisa. A partir desta perspectiva, este estudo visa avaliar as atividades hemorr?gica, anticoagulante e efeito citot?xico para as diferentes linhagens de c?lulas tumorais (HeLa, B16-F10, HepG2, HS-5,) e c?lulas de fibroblastos (3T3) proporcionadas pelo composto tipo heparina obtido do caranguejo Chaceon fenneri. Dessa forma, o composto foi purificado ap?s prote?lise, cromatografia de troca i?nica e fracionamento com acetona, e caracterizado por eletroforese em gel de agarose e degrada??o enzim?tica. O composto em estudo mostrou comportamento eletrofor?tico semelhante ? heparina de mam?fero, e alta raz?o de propor??o de dissacar?deos trissulfatado / N-acetilado. Al?m disso, o composto apresentou baixa atividade anticoagulante in vitro usando aPTT e um efeito hemorr?gico menor quando comparado com heparina de mam?fero. O composto tipo heparina obtido do caranguejo Chaceon fenneri mostrou efeito citot?xico significativo (p <0,001) em c?lulas linhagens de c?lulas tumorais HeLa, HepG2 e B16-F10 com valores de IC50 de 1000 ug / mL, ap?s a incuba??o durante 72 horas. Para avaliar a influ?ncia do composto sobre o ciclo celular em c?lulas HeLa, foi realizada uma an?lise por citometria de fluxo. Os resultados desta an?lise mostraram que a influ?ncia do composto sobre o ciclo celular aumenta a fase S e diminui a fase G2. Assim, essas propriedades do composto tipo heparina obtido do caranguejo Chaceon fenneri sugerem este composto como um agente terap?utico em potencial