Aplicação de Terapia Fotodinâmica (PDT) usando luz LED azul sobre culturas de Candida albicans - in vitro

• Main Author: Luz, Felipe Brunatto da
• Other Authors: 64166201034
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal de Pelotas 2017
• Subjects: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE; Boca; Doenças; Patologia Bucal; Candidíase Bucal
• Online Access: http://repositorio.ufpel.edu.br:8080/handle/prefix/3471

Submitted by Fabiano Malheiro ([e-mail]) on 2017-06-01T15:06:07Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Aplicação de Terapia Fotodinâmica (PDT) usando luz LED azul sobre culturas de candida albicans in vitro.pdf: 903559 bytes, checksum: d57e4b195e3104bd65820ee04210e36d (MD5) === Made available in DSpace on 2017-06-01T15:06:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Aplicação de Terapia Fotodinâmica (PDT) usando luz LED azul sobre culturas de candida albicans in vitro.pdf: 903559 bytes, checksum: d57e4b195e3104bd65820ee04210e36d (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 === Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES === O fungo Candida albicans é frequentemente encontrado como componente da microbiota da cavidade oral, sendo agente etiológico da candidíase eritematosa crônica (estomatite por dentadura). Condição esta, uma infecção oportunista, de caráter crônico que acomete grande parte dos usuários de próteses. O tratamento tradicional com antifúngicos, muitas vezes é duradouro, colaborando para o surgimento de cepas resistentes desse fungo. Assim sendo, torna-se necessária uma alternativa de tratamento efetiva contra a candidíase oral e que não apresente efeitos colaterais. O objetivo desse estudo foi desenvolver um novo dispositivo a partir de um fotopolimerizador odontológico, baseado na tecnologia LED com emissão de luz azul. Além disso, verificar a ação da PDT com azul de metileno associada ao uso dessa fonte sobre culturas de Candida albicans. Após o crescimento e identificação das colônias foram selecionadas 04 cepas de Candida albicans e 01 cepa ATCC (62342) e realizadas diluições obedecendo-se a escala 0,5 de Macfarland (1x108 UFC). Desse inóculo, foram colocados 100 µl em cada poço de uma placa de microtitulação de 96 poços. As amostras das colônias de Candida albicans foram distribuídas em triplicata nas placas de cultura. No grupo testado foram colocados 90 µl de PBS, adicionado a 10 µl de azul de metileno. As placas foram incubadas durante 30 minutos e, após esse período, foi realizada a irradiação com LED azul. Para realizar a PDT a placa foi dividida em 6 setores de dimensões iguais. Cada setor foi irradiado durante 6 minutos na dosimetria de 122 J/cm2, potência de 260 mW e comprimento de onda de 455 nm em aplicação única, totalizando 36 minutos de aplicação em cada placa. Após esse desafio, foram realizadas diluições seriadas 1:10 em 4 alíquotas sucessivas. Dessa diluição foram semeados 25 µl em placas de Petri e incubadas a 37ºC por 48 horas. Após esse período foram feitas as contagens das colônias por dois examinadores previamente treinados e calibrados. Os resultados foram analisados estatisticamente usando ANOVA seguido por teste de Tukey com 5% de nível de significância e não mostraram diferença estatisticamente significante (p>0,05) entre os diferentes grupos e o grupo controle. Constatando-se que a PDT usando fonte de luz LED é uma alternativa viável, no entanto no presente estudo não foi possível constatar a ação dessa terapia. === The fungus Candida albicans is often found as the microflora of the oral cavity component, as the etiological agent of erythematous candidiasis (denture stomatitis), this condition is an opportunistic infection, a chronic condition that affects most users of prostheses. Traditional treatment with antifungals, often lasting, contributing to the manifestation of resistant strains of this fungus. Therefore, it is necessary effective alternative treatment for oral candidiasis and who does not produce side effects. The aim of this study was to develop a new device from a dental curing light, based on the LED technology with blue light emission. As well, check the action of PDT with methylene blue associated with the use of this source on cultures of Candida albicans. After the growth and identification of colonies were selected 04 strains of Candida albicans and 01strain ATCC (62342) and made dilutions obeying the scale of 0.5 Macfarland (1x108 CFU). In this inoculum, 100 mL were placed in each well of a 96-well microtiter plate wells. Samples of colonies of Candida albicans were triplicate distributed in culture plates. On the test group 90 µl of PBS, added to 10 µl of methylene blue were placed. The plates were incubated for 30 minutes and, thereafter, irradiation was performed with blue LED. To perform PDT the plate was divided into 6 sectors of equal dimensions. Each sector was irradiated for 6 minutes dosimetry of 122 J/cm² power of 260 mW and wavelength of 455 nm in a single application, totaling 36 minutes of application on each plate. After this challenge, serial dilutions 1:10 in 4 successive aliquots were performed. This dilution were seeded 25 µl in Petri dishes and incubated at 37 ° C for 48 hours. After this period the numbers of colonies were made by two previously trained and calibrated examiners. The results were statistically analyzed using ANOVA followed by Tukey test at 5% significance level and showed no statistically significant difference (p> 0.05) between the different groups and the control group. The authors verified that PDT using LED light source is a viable alternative, however in this study it was not possible to observe the action of this therapy.