Avaliação de metabólito de Streptomyces sp., sua atividade antimicrobiana e citotoxicidade; identificação morfológica e molecular da actinobactéria

• Main Author: BORBA, Camila Beatriz Atanásio
• Other Authors: http://lattes.cnpq.br/2944428818449047
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal de Pernambuco 2018
• Subjects: Antibióticos; Bactérias; Antioxidantes
• Online Access: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/26878

Submitted by Pedro Barros ([e-mail]) on 2018-09-21T21:52:38Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Camila Beatriz Atanásio Borba.pdf: 1215389 bytes, checksum: 2c42564d7f3a485a35ffa8fdd0d3d3c6 (MD5) === Approved for entry into archive by Alice Araujo ([e-mail]) on 2018-09-24T17:19:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Camila Beatriz Atanásio Borba.pdf: 1215389 bytes, checksum: 2c42564d7f3a485a35ffa8fdd0d3d3c6 (MD5) === Made available in DSpace on 2018-09-24T17:19:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Camila Beatriz Atanásio Borba.pdf: 1215389 bytes, checksum: 2c42564d7f3a485a35ffa8fdd0d3d3c6 (MD5) Previous issue date: 2016-07-28 === O crescente número de infecções causadas por bactérias resistentes a antibióticos leva à busca para estudos de diferentes compostos bioativo. Neste contexto visando a busca de novos antimicrobianos, as actinobacterias vem sendo estudadas por sua capacidade de produzir metabólitos bioativos, antioxidantes, compostos terpenóides, enzimas e antimicrobianos. Dentro do filo o gênero streptomyces ganha destaque pois produzem 80% dos antibióticos conhecidos. Tendo em vista o potencial destes microrganismos para produção de compostos bioativos este trabalho tem objetivo produzir metabólito secundário de Streptomyces hygroscopicus avaliar sua atividade antimicrobiana, antioxidante e citotoxicicidade, bem como detectar as classes de compostos presentes, além de identificar morfológica e molecularmente a actinobactéria produtora. Inicialmente a atividade antimicrobiana foi realizada através de teste em difusão de poço, onde o extrato acetato de etila (EA) mostrou atividade frente a B. Subtillis (23,61mm) e S. aureus (21,61mm), o extrato metanólico (EM) e extrato hexânico (EH) frente as mesmas bactérias teste C. Kruzi (EM:11,92mm, AH: 8,86mm), B.subtillis (EM: 18,07mm, EH: 18,07mm), S. aureus (EM: 15,24mm, EH: 29,66mm), P. aeruginosa (EM: 20,95mm, EH:17,91), com excessão da E.coli (EM:12,87mm) em seguida foi executado CMI com 4 bactérias testes que apresentaram maior halo de inibição e Micobacterium tuberculosis ATCC. Grande parte dos extratos estudados mostraram atividade inibitória frente aos microrganismos testes quando em concentração de 10mg/mL, Já o extrato Acetato de etila (EA) frente a B.subtillis, e Metanólico frente a B.subtillis e P. aeruginosa obtiveram MIC > 10mg/mL, o extrato hexânico (EH) apresentou MIC de 1,25 mg/mL frente a B.subtillis. Os extratos apresentaram as seguintes valores de MIC, 5mg (EA), 2,5mg (EM) e 1,25mg (EH), frente a Micobacterium tuberculosis. Ao realizar a atividade antioxidante dos extrato através do método de DPPH, obtivemos os seguintes valores de IC50: 3,4916 mg/mL (EA), 2,0880 mg/mL (EM). Quando utilizado o método ABTS o extrato Acetato de etila (1,485 mg/mL) observou-se o pico de porcentagem de inibição do radical ABTS de 19,3548, e para o extrato metanólico (0,285 mg/mL), 19,7947. A detecção das classes de compostos foi realizada por Cromatografia em Camada Delgada (CCD), onde foram encontradas as seguintes classes: Protoantocianididas condensadas, leucoantocianidinas, cumarinas e saponinas no extrato metanólico, já no extrato acetato de etila foram encontrados derivados cinâmicos, triterpenos e esteroides. A citotoxicidade dos extratos estudados foi avaliada pela técnica de MTT, onde foi observado CC50 de 9,06 mg/mL para o extrato acetato de etila, 4,55 mg/ml para extrato hexânico e 1,81mg/mL para o extrato metanólico. Concluiu-se que à atividade antioxidante o extrato metanólico se mostrou mais promissor quando comparar ao extrato acetato, porém ao analisar suas toxicidades vê-se o contrário. Quanto a atividade antimicrobiana o extrato hexânico obteve melhores resultados, sendo efetivo frente a Micobacterium tuberculosis e B.subtillis, mostranto que extratos oriundos de Straptomyces hygrscopicus possue efetiva atividade antimicrobiana e antioxidante. === The increasing number of infections caused by bacteria resistant to antibiotics leads to a search for studies of different bioactive compounds. In this context aimed at the search for new antimicrobials, the actinomycetes have been studied for their ability to produce bioactive metabolites, antioxidants, terpenoids compounds, enzymes and antimicrobial. Within the phylum the Streptomyces genus is highlighted as they produce 80% of the known antibiotics. Given the potential of these microorganisms for the production of bioactive compounds this study aimed to produce secondary metabolite of Streptomyces hygroscopicus evaluate its antimicrobial activity, antioxidant and citotoxicicidade and detect classes of compounds and identify morphological and molecularly producer actinobacteria. Initially, the antimicrobial activity was performed by test well spread, where the ethyl acetate extract (EA) showed activity against B. subtilis (23,61mm) and S. aureus (21,61mm), the methanol extract (EM ) and hexane extract (EH) against the same test bacteria C. Kruzi (MS: 11,92mm, AH: 8,86mm), B.subtillis (MS: 18,07mm, EH: 18,07mm), S. aureus ( iN: 15,24mm, EH: 29,66mm), P. aeruginosa (MS: 20,95mm, EH: 17.91), with the exception of E. coli (MS: 12,87mm) was then run CMI 4 bacteria tests showed greater inhibition zone and Mycobacterium tuberculosis ATCC. Much of the extracts tested showed inhibitory activity against the test microorganisms when in a concentration of 10mg / mL, already the ethyl acetate extract (EA) against B.subtillis, and methanol against B.subtillis and P. aeruginosa obtained MIC> 10mg / ml, hexane extract (SH) showed MIC of 1.25 mg / mL against B.subtillis. When performing the antioxidant activity of the extract by DPPH method, we obtained the following IC50 values: 3.4916 mg / ml (EA), 2.0880 mg / ml (EM). When using the ABTS assay the ethyl acetate extract (1.485 mg / ml) observed peak percentage inhibition of ABTS radical 19.3548, and the methanol extract (0.285 mg / mL) 19.7947. The detection of classes of compounds was done by Thin Layer Chromatography (TLC) where the following classes were found: Protoantocianididas condensed, leucoanthocyanidins, coumarins and saponins in methanolic extract, as the ethyl acetate extract were found cinnamic derivatives, triterpenes and steroids . The cytotoxicity of the extracts tested was evaluated by MTT technique, which was observed CC50 9.06 mg / ml for the ethyl acetate extract, 4.55 mg / mL for the hexane extract and 1,81mg / ml to the methanolic extract. It was concluded that the methanol extract antioxidant activity was more promising when compared to acetate extract, but to analyze their toxicities sees otherwise. The antimicrobial activity hexane extract yielded better results, being effective against Mycobacterium tuberculosis and B.subtillis, mostranto that come from Straptomyces hygrscopicus extracts possesses effective antimicrobial and antioxidant.