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Previous issue date: 2004 === ß-D-Fructofuranosidase (Invertase, E.C. 3.2.1.26) de Saccharomyces cerevisiae, foi
covalentemente imobilizada em suporte cerâmico, sintetizado a partir de cinzas de
carvão mineral e pérolas de vidro (50-100μm), modificado com -
aminopropiltrietilxisilano (APTS), seguido de glutaraldeído que atua como agente
bifuncional, responsável pela ligação cruzada entre a enzima e o suporte inorgânico. Na
imobilização foi utilizado APTS a 2% (v/v) em tolueno, que após seu processo de
ativação promove uma união covalente do tipo alquilamina com o glutaraldeído a 2,5%
(v/v) em tampão fosfato de sódio a 10mM pH 7,4 que por sua vez une-se, também de
forma covalente, com a enzima via base de Schiff. Foi obtida uma estabilidade na
atividade do derivado em aproximadamente de 76,31% em 6 reusos, com sacarose a
876,42 mM em tampão citrato de sódio a 100mM e pH 4,6 a 55°C num sistema de fluxo
contínuo. Foram determinados os parâmetros cinéticos de Michaelis-Menten, Km e
Vmáx no qual foram estimados, tanto para a enzima livre, 58,7 e 72,69 mM.min-1,
respectivamente, quanto para a enzima imobilizada, 78,2 e 20,32mM.min-1. Foram
observadas, também, diferenças entre os valores máximos de pH, 5,0 para a livre e 5,6
para imobilizada e de temperatura 55°C para livre e 65 °C para a imobilizada, assim
como os seus valores de estabilidade, onde o derivado imobilizado apresentou uma
estabilidade térmica até 60°C e pH até 5,2. Essa alta estabilidade operacional e
disponibilidade de matéria-prima para a síntese do suporte determinam a viabilidade do
uso do suporte cerâmico na construção de biorreatores em sistemas contínuos para a
produção de glicose e frutose a partir da sacarose
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