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Previous issue date: 2011 === Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico === Os artrópodes se protegem das infecções através da imunidade inata, dividida em
reações celular e humoral. As células do sangue de invertebrados, os hemócitos, são
identificadas com base na morfologia, ultraestrutura e função fisiológica. Sendo a
fagocitose de corpos estranhos, como microorganismos, uma das funções celulares
desempenhadas pelos hemócitos durante a imunidade inata; enquanto que a defesa
humoral geralmente envolve componentes liberados pelos hemócitos, incluindo os
peptídeos antimicrobianos, proteases e inibidores de proteases. Os últimos
desempenham um papel importante como moduladores de vários processos biológicos,
em especial, a ativação da fenoloxidase e coagulação. A aranha brasileira Lasiodora sp,
amplamente distribuída na Região Nordeste do Brasil, é conhecida pelo nome trivial de
caranguejeira. Estes animais têm mais tempo de vida do que os outros artrópodes e esta
longevidade pode ser atrubuída aos hemócitos e suas funções (imunidade inata). A
maioria dos estudos de caracterização funcional e bioquímica de hemócitos de
artrópodes foram realizados em insetos, com uma limitada literatura sobre outros
grupos. O presente estudo relata, pela primeira vez, o isolamento e caracterização de
inibidor de elastase de neutrófilos humanos presente nos hemócitos de Lasiodora sp
(EILaH, do inglês Elastase Inhibitor of Lasiodora sp Hemocytes ) e a caracterização dos
hemócitos quanto a morfologia e função fagocitária. EILaH foi purificado por
cromatografia de afinidade em coluna de tripsina-sepharose seguida por cromatografia
de fase reversa. Eletroforese em gel de poliacrilamida em presença de sulfato sódico de
dodecila reveleou a massa molecular de 8 kDa e espectrometria de massa (MALDITOF)
revelou a massa molecular de 8274 Da. A seqüência amino terminal determinada
foi LPCP(F)PYQQELTC e a constante de inibição (Ki) para elastase de neutrófilos
humanos foi 0,32 nM. Seis tipos celulares de hemócitos foram determinados e
caracterizados quanto a presença de atividade fagocítica in vivo e in vitro. O estudo
contribui para a caracterização inédita do gênero e para a elucidação do papel
bioquímico de inibidores de proteases em hemócitos de aranhas
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