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Previous issue date: 2008 === Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco === A imuno-histoquímica é uma técnica de grande ajuda no diagnóstico de
doenças da mama, incluindo os tumores. De igual importância, a análise digital
de imagens vem sendo cada vez mais utilizada em estudos de alterações na
mama. O presente estudo teve como objetivo quantificar morfometricamente a
expressão do anticorpo através da imuno-histoquímica em tecidos de mama
normal e o carcinoma ductal infiltrante e compará-los com a histoquímica com
as lectinas Concanavalina A (Con A) e a Peanut agglutinin (PNA), todas
conjugadas a peroxidase. Fragmentos cirúrgicos de tecido mamário com CDI (n
= 25) foram fixados em formalina, submetidos à rotina histológica e embebidos
em parafina. Foram feitos cortes histológicos (4μm) montados em lâminas e
corados com hematoxilina e eosina (HE) para confirmar o diagnóstico. As
amostras teciduais selecionadas foram incubadas com anticorpo monoclonal
anti-vimentina por uma hora em temperatura ambiente (37ºC) e então
incubadas com um anticorpo secundário. A revelação foi realizada após
incubação com diaminobenzidina (DAB) e peróxido de hidrogênio. Os tecidos
serão desparafinizados em xilol e hidratados em álcool (70%-100%). As
lâminas foram megulhadas (10 min) em 10 mM de tampão fosfato(PBS) e
H2O2. Os cortes foram contracorados com hematoxilina e eosina rápida e
analisados em microscópio óptico. Para controle, as ligações das lectinas
foram inibidas utilizando-se methyl-α-D-manosídeo para Con A e D-galactose
para PNA (sigma USA). Nas 25 amostras de carcinoma ductal infiltrante foi
observada a marcação de 42% dos casos para vimentina e nesses casos foi
observado um aumento na marcação de PNA e diminuição da marcação com
Con A. Já no restante das amostras (58%) não houve marcação para vimentina
e os padrões de Con A e PNA foram invertidos em relação aos vimentina
positivos. Os diferentes perfis de expressão da vimentina oferecem um ótimo
suporte quantitativo para a investigação de células neoplásicas de mama
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