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Previous issue date: 2008 === Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico === Colagenases são enzimas proteolíticas capazes de degradarem diferentes tipos de
colágeno e apresentam alta especificidade a estas moléculas. Dentre os vários
organismos capazes de produzirem estas enzimas, estão as leveduras. As colagenases
têm as mais variadas aplicações. Destacam-se as aplicações na indústria de fármacos,
onde são utilizadas no tratamento de cicatrizes hipertróficas, na indústria de cosméticos
(dermocosméticos), usadas no tratamento de acnes e rugas, e na indústria alimentícia,
no amaciamento de carne. O presente trabalho objetivou a seleção de espécies do
gênero Candida, produtoras de colagenase extracelular, a determinação das condições
de cultivo para a produção da enzima através de processo fermentativo e a
caracterização bioquímica parcial da colagenase. Para isto, foram realizados
experimentos de fermentação com o auxílio de planejamentos estatísticos (fracionário-
26-2 e completo-23) para a seleção das melhores condições de produção. No estudo de
seleção identificou-se que a espécie Candida albicans URM3622 apresentou maior
atividade colagenolítica qualitativa no meio ágar-gelatina (halo = 25 mm), e quantitativa
(5,0 U/ml) utilizando azocoll como substrato. A análise dos dados do planejamento
estatístico fracionário (26-2) demonstrou que entre as variáveis estudadas (pH, tempo de
produção, velocidade de agitação, temperatura, concentrações do inóculo e do
substrato), a concentração do substrato (gelatina) e a velocidade de agitação foram as
variáveis mais significativas para a produção da colagenase. Com base nestes
resultados foram executados dois planejamentos estatísticos completos (23) sucessivos
nos quais foram estudados, a concentração do substrato, a velocidade de agitação e o
pH. Estes planejamentos demonstraram que todas as variáveis foram significativas para
a produção da enzima e que a produção máxima foi obtida utilizando o pH 7,0, a
velocidade de agitação de 160 rpm e a concentração de substrato de 2%. Sob estas
condições foi obtida uma atividade colagenolítica de 6,7 ± 0,2 (U/ml). No estudo da
caracterização parcial da enzima observou-se que a enzima apresentou o pH 8,2 como
ótimo para a sua atividade e a temperatura ótima de 45 ºC. A colagenase mostrou-se
estável aos valores de pH na faixa de 7,2 a 8,2 e à temperatura na faixa de 28 °C a 45
°C. Os resultados obtidos demonstram que a Candida albicans (URM3622), é uma
fonte viável de colagenase, sendo assim a sua produção é de interesse para as
indústrias farmacêutica, cosmética e alimentícia
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