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Previous issue date: 2013-01-15 === Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior ; Ministério da Educação e Cultura === Para estudar o efeito da desnutrição neonatal sobre o tecido muscular esquelético, foi avaliada
a sensibilidade dos miotubos em cultura à insulina, bem como os parâmetros biomecânicos
das células musculares cultivadas. Para isso, 12 ratos machos Wistar foram divididos em dois
grupos, nutrido (N), n = 6, e desnutrido (D), n = 6, segundo a dieta oferecida à mãe durante o
período de lactação (21 dias) de sua prole. Para o acompanhamento da evolução ponderal, os
animais foram pesados a cada 5 dias durante o período de aleitamento, e uma vez por semana
no período após a lactação. Após o desmame, os animais receberam dieta padrão de biotério
até o dia da coleta do músculo esquelético (60-70 dias). Através da otimização de protocolos
anteriores, um novo protocolo para a cultura de células musculares primárias foi estabelecido
com o objetivo de simplificar os procedimentos, reduzir o tempo para a confecção da cultura e
torná-lo menos dispendioso. Assim, as células musculares das patas posteriores dos animais
foram cultivados na presença de insulina (Ni, Di) ou na ausência desta (grupos controles Nc,
Dc) e, ao 10o de cultura, foram observados a taxa de proliferação celular e o percentual de
incorporação de núcleos pelos miotubos entre os animais N e D. Além disso, os parâmetros
biomecânicos dos miotubos foram caracterizados através da frequência de contração, do
percentual de amplitude, bem como pelo período de contração. Ao 21o dia, o peso dos animais
D mostrou-se inferior quando comparado ao peso dos animais N (N = 67.8 ± 3.0; D = 40.7 ±
1.9). Esta condição permaneceu até o dia da coleta dos músculos, entre 60-70 dias (N = 394 ±
28.4; D = 342.7 ± 20.7). A insulina não interferiu na taxa de proliferação dos mioblastos (Nc
= 2.61 ± 0.56; Ni = 2.49 ± 0.51; Dc = 3.12 ± 0.92; Di = 2.77 ± 0.81), mas reduziu o
percentual de incorporação de núcleo pelos miotubos dos animais D (Dc = 11.5 ± 8.9; Di =
7.0 ± 5.6). Miotubos de animais N e D, tratados com insulina, apresentaram maior número de
contrações por minuto (Nc = 17.6 ± 1.8, Dc = 16.4 ± 3.6; Ni = 29.2 ± 3.8; Di = 28.2 ± 4.2). O
percentual de amplitude não se mostrou diferente entre N e D (p=0.0687). A presença da
insulina aumentou o período de contração nos animais N (Ni = 1.2 ± 0.9; Dc = 0.8 ± 0.3),
enquanto que no grupo D provocou redução (Di = 0.8 ± 0.1; Dc = 0.9 ± 0.2). Houve redução
no período de contração no grupo Di, quando comparado ao grupo Ni (p<0.05). Assim, este
estudo permitiu complementar os conhecimentos sobre o efeito da desnutrição neonatal sobre
a ação da insulina no tecido muscular, além de possibilitar o surgimento de novas perspectivas
sobre o estudo do músculo esquelético em cultura.
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