Clonagem molecular de genes de Palythoa caribaeorum (Duchassaing & Michelotti, 1860) relacionados à imunidade inata
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:07:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5620_1.pdf: 8916043 bytes, checksum: 669ed68c15dd8910790b9473691f2d57 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 === Conselho Nacional de Desenvolvi...
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Universidade Federal de Pernambuco
2014
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ndltd-IBICT-oai-repositorio.ufpe.br-123456789-10792019-01-21T19:01:52Z Clonagem molecular de genes de Palythoa caribaeorum (Duchassaing & Michelotti, 1860) relacionados à imunidade inata MELO, Liany Figueredo de Andrade BAPTISTA, Gandhi Radis Palythoa caribaeorum Cnidaria Imunidade inata Branqueamento Lectina do tipo C (CTL) Lectina ligante de manose (MBL) Complemento C3 Domínio KIR-símile Made available in DSpace on 2014-06-12T15:07:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5620_1.pdf: 8916043 bytes, checksum: 669ed68c15dd8910790b9473691f2d57 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico Na ausência de um sistema imune adaptativo propriamente dito, os cnidários se valem de uma série de mecanismos bioquímicos e celulares que coletivamente compreendem sistemas da imunidade inata e são utilizados para o reconhecimento de micro-organismos, tanto parasitas quanto simbiontes. O objetivo do presente trabalho foi investigar se precursores gênicos relacionados a três polipeptídios envolvidos na resposta inata (CTL: lectina do tipo C, MBL: lectina ligante de manose e C3: componente 3 do sistema complemento) seriam expressos em Palythoa caribaeorum. Tendo como base dados moleculares descritos na literatura para os cnidários Nematostella vectensis, Pocillopora damicornis, Acropora millepora e Swiftia exserta, foram utilizadas duas estratégias metodológicas distintas para responder tal proposição: (1) síntese direta de cDNA a partir do RNAm e amplificação dos homólogos por RT-PCR e (2) construção de uma biblioteca de cDNA para propagação e resgate dos precursores completos (full length cDNAs). Ao todo, foram obtidos 11 produtos de RT-PCR (cDNAs amplificados), dos quais um se refere a um segmento similar a um domínio do receptor de imunoglobulinas das células NK (KIR), encontrado em gorilas. A presença de um domínio semelhante a KIR em P. caribaeorum sugeriria a existência de formas alternativas de imunidade antecipatória em cnidários. Tão importante quanto esse achado foi a obtenção de amplicons de CTL. Dessa forma, os níveis de expressão de transcritos de CTL foram comparados entre colônias sadias e doentes (em processo de branqueamento) de P. caribaeorum. Os resultados para o ensaio de expressão diferencial mostraram que a CTL teve uma expressão aumentada entre 63,2 e 65,5% nas colônias branqueadas, o que sugere um possível papel na resposta ao branqueamento, uma vez que essas moléculas participam do processo de reconhecimento celular. Esse resultado pode ser interpretado de duas formas: o aumento na transcrição de CTL após o branqueamento seria uma tentativa de proteção imediata contra patógenos ou estaria envolvido no recrutamento de novos simbiontes. Como um todo, o estudo de moléculas polipeptídicas da imunidade de cnidários é de importância considerável. Não somente fornece dados sobre a ancestralidade e evolução das reações imunes, mas também serve de base para uma série de aplicações de caráter científico e biotecnológico, que vão desde o monitoramento e conservação de espécies marinhas até estudos voltados ao tratamento e cura de doenças que acometem vertebrados superiores 2014-06-12T15:07:27Z 2014-06-12T15:07:27Z 2010-01-31 info:eu-repo/semantics/publishedVersion info:eu-repo/semantics/masterThesis Figueredo de Andrade Melo, Liany; Radis Baptista, Gandhi. Clonagem molecular de genes de Palythoa caribaeorum (Duchassaing & Michelotti, 1860) relacionados à imunidade inata. 2010. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2010. https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/1079 por info:eu-repo/semantics/openAccess Universidade Federal de Pernambuco reponame:Repositório Institucional da UFPE instname:Universidade Federal de Pernambuco instacron:UFPE |
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Previous issue date: 2010 === Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico === Na ausência de um sistema imune adaptativo propriamente dito, os cnidários se
valem de uma série de mecanismos bioquímicos e celulares que coletivamente
compreendem sistemas da imunidade inata e são utilizados para o reconhecimento
de micro-organismos, tanto parasitas quanto simbiontes. O objetivo do presente
trabalho foi investigar se precursores gênicos relacionados a três polipeptídios
envolvidos na resposta inata (CTL: lectina do tipo C, MBL: lectina ligante de manose
e C3: componente 3 do sistema complemento) seriam expressos em Palythoa
caribaeorum. Tendo como base dados moleculares descritos na literatura para os
cnidários Nematostella vectensis, Pocillopora damicornis, Acropora millepora e
Swiftia exserta, foram utilizadas duas estratégias metodológicas distintas para
responder tal proposição: (1) síntese direta de cDNA a partir do RNAm e
amplificação dos homólogos por RT-PCR e (2) construção de uma biblioteca de
cDNA para propagação e resgate dos precursores completos (full length cDNAs). Ao
todo, foram obtidos 11 produtos de RT-PCR (cDNAs amplificados), dos quais um se
refere a um segmento similar a um domínio do receptor de imunoglobulinas das
células NK (KIR), encontrado em gorilas. A presença de um domínio semelhante a
KIR em P. caribaeorum sugeriria a existência de formas alternativas de imunidade
antecipatória em cnidários. Tão importante quanto esse achado foi a obtenção de
amplicons de CTL. Dessa forma, os níveis de expressão de transcritos de CTL foram
comparados entre colônias sadias e doentes (em processo de branqueamento) de P.
caribaeorum. Os resultados para o ensaio de expressão diferencial mostraram que a
CTL teve uma expressão aumentada entre 63,2 e 65,5% nas colônias branqueadas,
o que sugere um possível papel na resposta ao branqueamento, uma vez que essas
moléculas participam do processo de reconhecimento celular. Esse resultado pode
ser interpretado de duas formas: o aumento na transcrição de CTL após o
branqueamento seria uma tentativa de proteção imediata contra patógenos ou
estaria envolvido no recrutamento de novos simbiontes. Como um todo, o estudo de
moléculas polipeptídicas da imunidade de cnidários é de importância considerável.
Não somente fornece dados sobre a ancestralidade e evolução das reações imunes,
mas também serve de base para uma série de aplicações de caráter científico e
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