Efeitos da radiacao gama no crescimento de Aspergillus flavus produtor de aflatoxinas e no emprego da tecnica da Reacao em Cadeia da Polimerase (PCR) em amostras de graos de milho inoculadas artificialmente

• Main Author: AQUINO, SIMONE
• Other Authors: Anna Lucia Casanas Haasis Villavicencio
• Format: Others
• Published: 2003
• Subjects: maize; seeds; aspergillus; aflatoxins; gamma radiation; biological radiation effects; polymerase chain reaction; dna
• Online Access: http://repositorio.ipen.br:8080/xmlui/handle/123456789/11253

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:49:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 === Made available in DSpace on 2014-10-09T14:02:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 === O presente trabalho teve como objetivos verificar os efeitos da radiação gama em grãos de milho contaminados artificialmente com Aspergillus flavus Link produtor de aflatoxinas; demonstrar a aplicação da técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) no diagnóstico de A. flavus, bem como verificar o efeito da radiação no perfil das bandas de DNA. Vinte amostras de grãos de milho com 200 g cada foram irradiadas individualmente com 20 kGy, para eliminar a contaminação microbiana. Em seguida, as amostras foram inoculadas com A. flavus toxigênico (1 x 106 esporos / ml), incubadas por 15 dias a 25 °C em ambiente com umidade relativa ao redor de 97,5% e irradiadas com 0; 2; 5 e 10 kGy. As amostras, 5 para cada dose de irradiação, foram analisadas individualmente quanto ao número de células fúngicas, atividade de água, teste de viabilidade (diacetato de fluoresceína e brometo de etídio), PCR e detecção de aflatoxinas (AFB). Os resultados demonstraram que as doses utilizadas foram efetivas na redução do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC/g), principalmente as doses de 5 e 10 kGy. Em adição, o teste de viabilidade mostrou uma diminuição de células viáveis com o aumento das doses de irradiação. A redução de AFB1 e AFB2 foi mais eficiente com o emprego de 2 kGy, comparativamente à dose de 5 kGy, enquanto a dose de 10 kGy degradou totalmente as aflatoxinas. Além disso, observou-se que AFB2 apresentou-se mais radiosensível. O emprego da técnica de PCR revelou a presença de bandas de DNA em todas as amostras. === Dissertacao (Mestrado) === IPEN/D === Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN/CNEN-SP