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Previous issue date: 2017-07-31 === Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq === The presence of heavy metals in the soil has increased, causing many problems of
an agricultural nature. Trichoderma are a species which is among the most well know
and used biocontrol agents wordwide, as well as possessing qualities such tha
parasitism and antibiosis, they have great resistance to metals and can also absorb
them. Therefore, it is necessary for more detailed studies of the resistance of this
fungus to metals and to research further the processes involved. In this work, we
aimed to better understand the tolerance of T. harzianum to aluminum chloride,
though a series of experiments performed in BDA, MEX e MYG, as well Bradford
tests for quantification of proteins. In addition, we evaluated the gene response to
metal stress through the sequencing RNA samples obtained when the fungus was
created in BDA medium and submitted to concentrations of 1.5 and 3.0 mg / mL of
aluminum chloride, 1.5 mg / mL, the fungus showed significant inhibition. It was
observed that T. harzianum showed higher mycelial growth when grown in BDA
medium compared to MEX and MYG, presenting levels of protein secretion inversely
proportional to increasing concentrations of aluminum. The amount of transcriptionspecific
factors of the stress response was increased, as well as the induction of
genes involved in G-mediated cell signaling and increase in genes involved in
vacuolar transport and carrier proteins. A repression of genes encoding proteins
associated with cellular processes important for the growth of T. harzianum was also
observed. These results show that T. harzianum is resistant to aluminum since it is
able to tolerate and absorb large concentrations of this metal, which is commonly
harmful to agriculture. === A presença de metais pesados no solo tem sido cada vez mais frequente, aumentando
dentre vários problemas, os de cunho agrícola. Espécies de Trichoderma estão entre
os agentes de biocontrole mais conhecidos e empregados mundialmente, pois além de
possuir ações como parasitismo e antibiose, possui grande resistência a metais,
podendo também absorvê-los. Sendo assim, faz-se necessário, estudos mais
aprofundados a cerca da resistência desse fungo a metais, envolvendo pesquisas que
esclareçam melhor os processos envolvidos. Neste trabalho, objetivamos melhor
compreensão a cerca da tolerância de Trichoderma harzianum ao alumínio, através do
seu crescimento em diferentes meios de cultura com variadas concentrações do metal.
Avaliamos também a secreção de proteínas quando o fungo crescia na presença de
alumínio. Além disso, analisamos a resposta gênica ao estresse pelo metal através do
sequenciamento de amostras de RNA obtidas quando o fungo foi crescido em meio
BDA e submetido às concentrações de 1,5 e 3,0 mg/mL de cloreto de alumínio. Foi
possível constatar que T. harzianum apresenta maior crescimento micelial quando
crescido em meio BDA, comparado aos meios MEX e MYG, apresentando níveis de
secreção de proteínas inversamente proporcionais às concentrações crescentes de
alumínio. Foi observada alteração na expressão gênica através do aumento da
quantidade de determinados fatores de transcrição de resposta a estresse, além da
indução de genes envolvidos em sinalização celular mediada por proteína G e
aumento em genes envolvidos com transporte vacuolar e proteínas transportadoras. A
repressão de genes que codificam proteínas associadas a processos celulares
importantes para o crescimento de T. harzianum também foi observada. No entanto,
nossos resultados evidenciam que T. harzianum apresenta resistência significativa ao
alumínio, uma vez que se mostra capaz de tolerar e absorver grandes concentrações
deste metal, comumente prejudicial à agricultura.
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