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Previous issue date: 2016-05-09 === Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES === Paracoccidoides brasiliensis and Paracoccidioides lutzii, the etiologic agents of paracoccidioidomycosis, cause disease in healthy and immunocompromised persons in Latin America. We developed a method for harvesting P. brasiliensis yeast cells from infected murine lung to facilitate in vivo transcriptional and proteomic profiling. P. brasiliensis harvested at 6 h post-infection were analyzed using RNAseq and LC-MSE. In vivo yeast cells had 594 differentially expressed transcripts and 350 differentially expressed proteins. Integration of transcriptional and proteomic data indicated that early in infection (6 h), P. brasiliensis yeast cells underwent a shift in metabolism from glycolysis to β-oxidation, upregulated detoxifying enzymes to defend against oxidative stress, and repressed cell wall biosynthesis. Bioinformatics and functional analyses also demonstrated that a serine proteinase was upregulated and secreted in vivo. To our knowledge this is the first study depicting transcriptional and proteomic data of P. brasiliensis yeast cells upon 6 h post-infection of mouse lung. === Paracoccidoides brasiliensis e Paracoccidioides lutzii, os agentes etiológicos da paracoccidioidomicose, causam doenças em pessoas saudáveis e imunocomprometidas na América Latina. Desenvolvemos um método para coletar células de levedura de P. brasiliensis de pulmão murino infectado para facilitar o estudo do perfil transcricional e proteômico in vivo. P. brasiliensis recuperados após 6 horas de infecção foram analisados usando RNAseq e LC-MSE. As células de levedura após passagem in vivo apresentaram 594 transcritos expressos diferencialmente e 350 proteínas diferencialmente expressas. A
integração dos dados transcricionais e proteômicos indicou que ainda no início da infecção (6 h), as células de levedura de P. brasiliensis sofreram uma mudança no metabolismo da glicólise para β-oxidação, enzimas desintoxicantes reguladas para se defender contra o estresse oxidativo e repressão da biossíntese de parede. Análises de bioinformática e funcionais também demonstraram que uma serino proteinase foi regulada e secretado in vivo. Pelo o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo que descreve a transcrição e dados proteômicos de células de levedura de P. brasiliensis após 6 h de infecção no pulmão de camundongo.
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