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Previous issue date: 2017-02-20 === Leptospirosis is an important zoonosis and it causes economic losses due to abortion, mastitis,
infertility, and drop in milk production in affected herds. The disease may be disseminated through
urine, water, contaminated soils, venereal and transplacental routes, and there is a risk of transmission
by in vitro embryo manipulation. Thus, with the advancement of reproductive biotechnology, the
concern with the sanity of animals or herds in the face of any disease also transmitted by semen or
embryos has increased. As an alternative for the inactivation of infectious agents, the technique of
photodynamic inactivation (PDI) has became prominent as it does not cause natural microbial
resistance. The method consists in the combination of a photosensitizer (PS), light, and molecular
oxygen, resulting in the formation of reactive oxygen species (ROS) that at high levels induce cell
death. In this study, in order to inactivate in vitro Leptospira interrogans, six PSs were tested at a
concentration of 10 μM and at the irradiation times of 30 and or 60 min. The TMPP and ZnTMPP
porphyrins were efficient, the first one in the 30 min irradiation, the second one in both irradiation
times. Methylene Blue (MB) demonstrated satisfactory inactivation when irradiated for 60 min.
Hematoporphyrin and phthalocyanines did not demonstrate efficiency in the inactivation of leptospires
in the experimental parameters used. When evaluating the action of ZnTMPP and MB on oocyte
viability, both demonstrated to be innocuous to cumulus-oocyte (CCOs) complexes matured in the 30
min, which makes them potential candidates for the disinfection of biological materials or by-products
of animal origin in place of antibiotics, known to cause bacterial resistance. === A leptospirose é uma importante zoonose e traz consideráveis perdas econômicas em
decorrência de abortamentos, mastites, infertilidade e queda da produção de leite em
rebanhos acometidos. A doença pode ser disseminada pela urina, água, solos
contaminados, via venérea, transplacentária e há risco de transmissão pela manipulação
de embriões in vitro. Dessa forma, com o avanço das biotécnicas reprodutivas, a
preocupação com a sanidade de animais ou rebanhos frente a qualquer enfermidade
também transmitida por sêmen ou embriões tem aumentado. Como alternativa para a
inativação de agentes infecciosos, a técnica de inativação fotodinâmica (PDI) vem
ganhando destaque por não causar resistência microbiana natural. O método consiste na combinação de um fotossensibilizador (PS), luz e oxigênio molecular, resultando na
formação de espécies reativas de oxigênio (ROS) que em altos níveis induzem a morte
celular. Neste trabalho, com o objetivo de inativar a Leptospira interrogans in vitro, seis
PSs foram testados na concentração de 10 μM e em tempos de irradiações de 30 e ou 60
min. As Porfirinas TMPP e ZnTMPP mostraram-se eficientes, a primeira na irradiação de
30 min, a segunda em ambos os tempos de irradiação testados. O Azul de Metileno (MB)
demonstrou uma inativação satisfatória quando irradiado por 60 min. Hematoporfirina e
Ftalocianinas testadas não demostraram eficiência na inativação das leptospiras nos
parâmetros experimentais analisados. Ao avaliar a ação da ZnTMPP e do MB sobre a
viabilidade dos oócitos, ambos demonstraram ser inócuos aos complexos cumulusovócitos
(CCO’s) maturados no tempo de 30 min, o que os torna potenciais candidatos à
utilização para a desinfecção de materiais biológicos ou subprodutos de origem animal em
substituição aos antibióticos, conhecidamente causadores de resistência bacteriana.
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