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Previous issue date: 2015-05-22 === Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES === Leishmaniasis is a neglected disease, caused by protozoa of the genus Leishmania, which affects organs (visceral leishmaniasis), skin and mucous (American tegumentary leishmaniasis, ATL). The treatment of ATL is effective, however causes several collateral effects, and the absence treatment or incomplete treatment is associated with relapse. Alternative treatments should, therefore, be explored, and low potency lasers indicate the possibility of a noninvasive therapy without collateral effects and that can act together with conventional therapy. LLLT (Low-Level Laser Therapy) was applied on experimental mice BALB/c lesions, caused by Leishmania (Leishmania) amazonensis (MAB-6) in order to evaluate the healing time. The cytokines profile expression was evaluated by real-time PCR and ELISA, and Immunohistochemistry was performed to quantify M2 macrophages using MP-23 antibody. In the lesions treated with laser, it was observed a lower healing time when compared with the group of animals with untreated injuries. Moreover, it was observed an increased expression of regulatory and anti-inflammatory cytokines in the inflammatory infiltrate. We evaluated the effect of laser on macrophages RAW264.7, differentiated or not for the M1 or M2 profile, and infected in vitro. Also, we evaluated the phagocytic activity by quantification of the infected macrophages and the number of amastigotes per infected macrophage at 4 and 24 hours after infection; and nitric oxide (NO) production. The laser treatment increased the NO production and phagocytic activity of macrophages in different profiles, including those macrophages that were not differentiated before the infection. The 660nm laser stimulates macrophages and accelerates the healing of experimental injuries caused by L. amazonensis. Depending on the stage of the infection that the treatment is initiated, the laser may affect the inflammatory phase for the elimination of the parasite or stimulate the proliferative phase regulators and anti-inflammatory cytokines. === A leishmaniose é uma doença negligenciada, causada por protozoários do gênero Leishmania, que acomete órgãos (leishmaniose viceral), pele e mucosas (leishmaniose tegumentar americana, LTA). O tratamento da LTA é eficaz, contudo causa inúmeros efeitos colaterais, e o não tratamento ou o tratamento incompleto está associado com casos de recidivas. Tratamentos alternativos, portanto, devem ser explorados, e os laseres de baixa potência apontam para a possibilidade de uma terapia não invasiva, sem efeitos colaterais e que podem atuar em conjunto com a terapia convencional. A LLLT (Low-Level Laser Therapy) foi aplicada sobre lesões experimentais de camundongos BALB/c, causadas por Leishmania (leishmania) amazonensis (MAB-6) e avaliado o tempo de cicatrização, por PCR em tempo real e ELISA o perfil de expressão de citocinas, e por Imunoistoquímica foi feita a quantificação de macrófagos M2 pelo anticorpo MP-23. Nas lesões tratadas com laser o tempo de cicatrização foi menor que no grupo de animais com lesões não tratadas. Além disso, foi constatada uma maior expressão de citocinas regulatórias e antiinflamatórias no infiltrado inflamatório. Avaliamos o efeito do laser sobre macrófagos RAW264.7 diferenciados ou não para o perfil M1 ou M2, e infectados in vitro. Foram avaliados os quesitos de atividade fagocítica através da quantificação de macrófagos infectados e número de amastigotas por macrófagos infectados às 4 e 24 horas após a infecção; e produção de óxido nítrico (NO). O tratamento com o laser aumentou a produção de NO e a atividade fagocítica nos diferentes perfis de macrófagos, inclusive naqueles macrófagos que não foram diferenciados antes da infecção. O laser de 660nm estimula os macrófagos e acelera a cicatrização. Dependendo da fase da infecção em que se inicia o tratamento o laser pode influenciar a fase inflamatória, para a eliminação do parasito, ou na fase proliferativa estimulando citocinas reguladoras e antiinflamatórias..
Palavras-chave: Leishmaniose tegumentar americana; Terapia com laser de baixa potência; Macrófagos; Cicatrização; Citocinas.
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