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Previous issue date: 2006-08-23 === Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior === Fleas are ectoparasites commonly found in dogs and cats and the species
Ctenocephalides felis (Bouch?, 1835) are the most found in these animals.
Ctenocephalides felis felis life cycle is influenced by temperature and humidity. This
haematophagous insect feeds for approximately 30 days; its bite can cause allergic
dermatitis and also can transmit several etiologic agents to domestic animals and
humans. The objectives of the work were verifying the in vitro pathogenicity of the
fungi Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana on eggs and adults of C. felis
felis and investigated by scanning electron microscopy the development of
entomopathogenic fungi on flea cuticle. Fleas were exposed to conidia (108 ml 1) of
Metarhizium anisopliae (isolate 959) or Beauveria bassiana (isolate 986). The eggs and
the adults used in the experiments were obtained from the colony, and were aspirated
for the tubes (10 each). In the tests of effectiveness, the bioassays were constituted of
two groups control and four groups treated with the suspensions in the concentrations
105, 106, 107 and 108 conidia.mL-1, and for each treatment they were made ten
repetitions. Each group received a milliliter of the suspension to be tested, staying
immersed by three minutes. The observations were done on each 12 hours and during
the experimental phase the tubes were conditioned in acclimatized chamber in 25 1 C e
= 75 % of relative humidity. The results demonstrated that the concentration 108
conidia.mL-1 of the two species inhibited the larval eclosion and caused the mortality of
adults. Following standard protocols for electron microscopy, the specimens were
prepared 2, 15, 26 and 96 h after infection. Glutaraldehyde 2.5% was used as a fixative.
The electromicrography revealed that 2 h after fungus exposure, conidia attachments
encompassed the entire flea cuticle, especially on abdominal intersegmental
membranes. The emergence of germ tubes and appressoria formation occurred at 15 h,
thickening and branching of hyphae on the flea cuticle was noted at 26 h. Therefore,
both of these fungal isolates were able to develop on cuticular surfaces of
Ctenocephalides felis felis. === As pulgas s?o ectoparasitas comumente encontrados em c?es e gatos, sendo a esp?cie
Ctenocephalides felis (Bouch?, 1835), a mais encontrada nestes animais. O ciclo de
Ctenocephalides felis felis ? influenciado pela temperatura, umidade e a alimenta??o se
completa em aproximadamente 30 dias. A sua picada pode acarretar manifesta??o de
dermatites al?rgicas, como tamb?m transmitir diversos agentes etiol?gicos aos animais
dom?sticos e aos homens. O objetivo do trabalho foi de verificar a patogenicidade in vitro
dos fungos Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana sobre ovos e adultos de C.
felis felis e o desenvolvimento do fungo sobre a cut?cula da pulga, atrav?s da
microscopia eletr?nica de varredura. Os isolados testados foram o M. anisopliae 959 e
B. bassiana 986 na concentra??o 108 con?dios/mL. Os ovos e os adultos utilizados nos
experimentos foram obtidos a partir da col?nia de onde foram aspirados em n?mero de
dez para os tubos de ensaios. Nos testes de efic?cia, os bioensaios foram constitu?dos de
dois grupos controle e quatro grupos tratados com as suspens?es nas concentra??es 105,
106, 107 e 108 con?dios.mL-1, e para cada tratamento foram feitas dez repeti??es. Cada
grupo recebeu, um mililitro da suspens?o a ser testada, permanecendo imersos por tr?s
minutos. A leitura foi realizada a cada 12h e durante todo a fase experimental os tubos
ficaram acondicionados em c?mara climatizada a 25 ? 1?C e = 75 % UR. Os resultados
demonstraram que a concentra??o 108 con?dios.ml-1 das duas esp?cies avaliadas se
destacou das demais devido ao efeito delet?rio observado sobre larvas e adultos. Para a
observa??o do desenvolvimento do fungo, as pulgas foram processadas em diferentes
per?odos ap?s a infec??o, estipulados em 2, 15, 26 e 96 horas. O fixador utilizado foi o
glutaralde?do 2,5 % e o material foi processado, segundo protocolo rotineiro para a
microscopia eletr?nica de varredura. Com a obten??o das eletromicrografias, pode-se
observar que com 2 horas os con?dios estavam aderidos por toda a cut?cula, situando-se
preferencialmente nas membranas intersegmentais do abdome. Com 15 horas observouse
a forma??o do tubo de germina??o e a cabe?a do apress?rio. Ap?s 26 horas foi
poss?vel observar as ramifica??es e o engrossamento das hifas sobre a cut?cula das
pulgas, indicando que os fungos testados foram capazes de se desenvolver sobre a
cut?cula das mesmas.
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