Avaliação da eficácia do sistema poli(ε -caprolactona) de liberação controlada de metotrexato em um modelo murino de inflamação e angiogênese.

• Main Author: Oliveira, Leandro Gonzaga de
• Other Authors: Moura, Sandra Aparecida de Lima
• Language: Portuguese
• Published: 2014
• Subjects: Implantes artificiais; Inflamação; Metotrexato
• Online Access: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/3593

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. === Submitted by Maurílio Figueiredo ([e-mail]) on 2014-08-07T21:17:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoEficáciaSistema.pdf: 2389267 bytes, checksum: 35b005c2cba305d566fb224a55f653eb (MD5) === Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho ([e-mail]) on 2014-08-19T15:48:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoEficáciaSistema.pdf: 2389267 bytes, checksum: 35b005c2cba305d566fb224a55f653eb (MD5) === Made available in DSpace on 2014-08-25T12:33:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoEficáciaSistema.pdf: 2389267 bytes, checksum: 35b005c2cba305d566fb224a55f653eb (MD5) Previous issue date: 2014 === O direcionamento da liberação dos fármacos permite que doses menores destas substâncias sejam utilizadas para o tratamento de doenças e reduzem a incidência dos efeitos colaterais que poderiam ser provocados por estes princípios ativos. Neste trabalho, propusemos avaliar a eficácia de implantes à base de poli(ε-caprolactona) e incorporados de metotrexato (PCL-MTX), uma substância com propriedades anti-inflamatória e antiproliferativa. Para cumprir com esse objetivo, utilizou-se o modelo experimental de inflamação e angiogênese a partir de implantes subcutâneos de esponjas de poliéster e poliuretano na região dorsal de camundongos Balb/c. Após 4 dias de inserção dessas esponjas, os sistemas poliméricos de PCL com MTX (grupo tratado) e sem o MTX (grupo controle) foram implantados adjacentes ao sítio de inserção das esponjas. No período de 0h, 24h, 48h e 96 horas pós-implantes do PCL-MTX, os camundongos foram eutanasiados e tiveram as esponjas removidas para análises posteriores. Nos tempos de 48 e 96 horas pós tratamento os marcadores angiogênicos (índice de Hb, número de vasos e níveis de TNF-α indicaram que no grupo tratado ocorreu uma redução significativa desses marcadores da ordem de 85% a 90%, aproximadamente. A análise histológica revelou discreto infiltrado inflamatório, composto por neutrófilos, escassos macrógafos e raros brotos vasculares nos grupos tratados. A deposição de colágeno e o número de fibroblastos na matriz esponjosa foram discretos e constituídos predominantemente por colágeno do tipo III. Tais achados foram confirmados por meio da dosagem de NAG, (índice indireto de macrófagos ativados) e pela dosagem de MPO (índice indireto da ativação de neutrófilos). A análise das citocinas pró-inflamatórias TNF-e IL-6 mostrou nívies reduzidos dessas proteínas nos animais do grupo tratado. Os resultados obtidos indicaram que os sistemas poliméricos permitiram a liberação controlada in vivo de MTX em concentrações que possibilitaram o controle da angiogênese e a diminuição dos marcadores inflamatórios produzidos no microambiente inflamatório dos implantes de esponja. Nossos resultados não demostraram alterações dos marcadores hepáticos e renais em nenhum dos tempos analisados. Diante dos dados obtidos, podemos concluir que os implantes poliméricos de PCL-MTX foram eficazes em controlar os eventos inflamatórios e angiogênicos no modelo de estudo proposto. Adicionalmente, o modelo experimental utilizado revelou-se promissor para futuros ensaios com sistemas de liberação controlada, utilizando o polímero poli(ε-caprolactona), incorporados a diferentes fármacos nos contextos inflamatório, angiogênico e proliferativo. __________________________________________________________________________________________ === ABSTRACT:The targeting and modulating release of the drugs allows that small doses of these substances can be used for the treatment of diseases and thus reduce the incidence of side effects that could be caused by these active principles. In this work, we have proposed systems to evaluate the efficacy of implants based on poly (ε-caprolactone) and incorporated methotrexate (MTX-PCL), a substance with anti-inflammatory and antiproliferative properties. To achieve this goal, we used the experimental model of inflammation and angiogenesis from subcutaneous implants of polyester and polyurethane sponges inserted in the dorsal region of BALB / c mice. After 4 days of insertion of these sponges, polymeric PCL systems with MTX (treated group) and without MTX (control group) were implanted in the adjacent site of the sponges. In the period 0h, 24h, 48h and 96 h after MTXPCL implants, mice were euthanized and the sponges removed for further analysis. In times of 48 and 96 hours after treatment, the angiogenic markers (index Hb, number of vessels and TNF-α) showed significant reduction of these markers on treated group on the order of 85% to 90% approximately. Histological analysis revealed a small inflammatory infiltrate composed of neutrophils, macrógafos scarce and rare vascular sprouts in the treated groups. The deposition of collagen and the number of fibroblasts in the spongy matrix were discrete and consists predominantly of collagen type III. These findings were confirmed by measurement of NAG (indirect index of activated macrophages) and by measurement of MPO (an indirect index of neutrophil activation). analysis of TNF-and IL-6 proinflammatory cytokines showed reduced ní in animals belonged to the treated group. The results indicated that polymeric systems allows the controlled release of enough amount of MTX in vivo in order to control the angiogenesis process and reduction of inflammatory markers produced in the inflammatory microenvironment of sponge implants. Our results demonstrated no changes in hepatic and renal markers on any times of the experiment. In this study, we conclude that polymeric implants with PCL-MTX were effective in controlling the inflammatory and angiogenic events in the site of inflamation. Additionally, the experimental model can be used in the future in studies with controlled release systems using poly (ε-caprolactone), into the different drugs in inflammatory, angiogenic and proliferative contexts