Qualidade do sêmen fresco e criopreservado de touros pantaneiros : efeito da época do ano e antioxidantes

• Main Author: Silva, Luis Eduardo Senra e
• Other Authors: Zervoudakis, Luciana Keiko Hatamoto
• Language: Portuguese
• Published: Universidade Federal de Mato Grosso 2017
• Subjects: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::ZOOTECNIA; Antioxidantes; Estresse oxidativo; Sazonalidade; Antioxidant; Oxidative stress; Seasonality
• Online Access: http://ri.ufmt.br/handle/1/452

Submitted by Simone Souza ([e-mail]) on 2017-08-25T13:04:14Z No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Luis Eduardo Senra e Silva.pdf: 858092 bytes, checksum: 42044e08bf0d95dd837a3a995e85cb8e (MD5) === Approved for entry into archive by Jordan ([e-mail]) on 2017-08-30T11:48:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Luis Eduardo Senra e Silva.pdf: 858092 bytes, checksum: 42044e08bf0d95dd837a3a995e85cb8e (MD5) === Made available in DSpace on 2017-08-30T11:48:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISS_2014_Luis Eduardo Senra e Silva.pdf: 858092 bytes, checksum: 42044e08bf0d95dd837a3a995e85cb8e (MD5) Previous issue date: 2014-04-02 === CNPq === O estresse térmico normalmente leva a degeneração testicular em reprodutores bovinos e entre eles os Bos taurus são menos resistentes às alterações. Embora sejam de origem europeia os animais da raça Pantaneiro estão adaptados à região do Pantanal, e desse modo não se sabe qual a sua suscetibilidade as altas temperaturas e a influência em relação à qualidade seminal. No que diz respeito à criopreservação de sêmen, sabe-se que uma das principais causas da redução da sua qualidade é o estresse oxidativo, embora muitas pesquisas tenham sido feitas no sentido de fornecer agentes antioxidantes aos animais e diminuir a peroxidação dos lipídios causadas pelos radicais livres, resultados contraditórios tem sido encontrados e poucos pesquisadores têm levado em conta o estado fisiológico dos animais. Neste contexto, nosso objetivo foi avaliar a sazonalidade sobre a qualidade espermática de touros Pantaneiros, bem como, identificar o efeito da adição de antioxidantes ao diluidor seminal em épocas de características climáticas distintas. No experimento 1 foram utilizados 7 reprodutores Pantaneiros e 3 Nelore, a coleta de sêmen foi feita em Janeiro e Julho de 2013 e foram avaliados, circunferência e consistência testicular, motilidade, vigor, viabilidade, concentração, integridade de membrana acrossomal, morfologia espermática, atividade citoquímica mitocondrial e a quantidade de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, e arranjo fatorial 2x2 (2 raças e 2 estações do ano). A integridade da membrana plasmática foi menor na estação de inverno (95,76 ± 1,77% vs. 87,07 ± 4,78% P=0,03), os animais da raça Nelore tiveram maior quantidade de defeito menor no verão (2,16 ± 1,09% vs. 0,57 ± 0,31%; P=0,02), maior porcentagem de defeito maior (61,91 ± 5,92% vs. 26 ± 3,83% P=0,01) e defeitos totais (62,58 ± 5,63% vs. 27,33 ± 3,91% P=0,03) no inverno. O do sêmen congelado não sofreu influencia da raça, estação do ano ou interação entre eles. Os resultados encontrados podem ser explicados pela adaptação dos animais Pantaneiros ao Pantanal deste modo, nesta região, reprodutores Pantaneiros são mais indicados, uma vez que sua qualidade seminal não é afetada negativamente pela estação do ano. No experimento 2 foram utilizados os mesmo animais, porém no momento da diluição do sêmen foi adicionado 10 mM de Trolox/20x106 espermatozoides; ou 2,25 mg de ácido ascórbico/20x106 de espermatozoides; ou ainda a combinação entre eles. Após a descongelação foi realizada a análise de motilidade, vigor, viabilidade espermática, integridade de membrana acrossomal, atividade citoquímica mitocondrial e peroxidação lipídica espontânea. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, e arranjo fatorial 2x2x4 (2 raças e 2 estações do ano e 4 tratamentos antioxidantes). Nenhuma das variáveis apresentou diferença significativa. A motilidade, vigor, integridade acrossomal e atividade mitocondrial foram reduzidas com a adição de antioxidantes (P<0,05) em especial a interação entre vitamina C e Trolox. Ainda, a adição de antioxidantes não mudou o nível de lipoperoxidação (P.0,05). Os resultados podem ser explicados pela diminuição dos níveis de espécies reativas de oxigênio causada pelos antioxidantes e uma possível inibição da sinalização para eventos como movimento do espermatozoide e atividade das mitocôndrias, dessa forma, pode-se inferir que os animais utilizados não apresentavam deficiência de vitaminas e a sua demanda, especialmente de vitamina E, foi atendida pela alimentação. === Heat stress usually leads to testicular degeneration in cattle breeding and Bos taurus are less resistant to alterations. Although the Pantaneiro breed is European origin the animals are adapted to Pantanal region, and thus it is unclear what their susceptibility to high temperatures and influence in relation to semen quality. Regarding the cryopreservation of semen , it is known that a major cause of the reduction in quality is oxidative stress, although many investigations have been made to provide antioxidants agents to animals and decrease the lipid peroxidation caused by radical free, contradictory results have been found and many researchers have taken into account the physiological status of the animals. In this context, our objective was to evaluate the seasonality on sperm quality Pantaneiro bulls, as well as identify the effect of adding antioxidants to semen extender in times of different climatic conditions. In experiment 1, 7 Pantaneiro breeding and 3 Nellore were used, semen collection was taken in January and July 2013 were evaluated, circumference and testicular consistency, motility, vigor, viability, concentration, acrosomal membrane integrity, sperm morphology, activity mitochondrial cytochemistry and the amount of thiobarbituric acid reactive substances. The experiment was conducted in a completely randomized design and a 2x2 factorial arrangement (2 breeds and 2 seasons). The membrane integrity was lower in the winter season (95.76% ± 1.77 vs. 87.07% ± 4.78, P = 0.03 ), the Nelore breed had higher amount of minor defect in summer (2.16% ± 1.09 vs. 0.57% ± 0.31; P= 0.02 ), higher percentage of larger defect (61.91% ± 5.92 vs. 26% ± 3.83 P= 0.01) and total defects (62.58% ± 5.63 vs. 27.33% ± 3.91 P= 0.03) in winter. The frozen semen was not affected by breed, season or interaction between them. These results can be explained by the adaptation of animals Pantaneiro to the Pantanal region, breeding Pantaneiro are more suitable, since his seminal quality is not adversely affected by the season. In experiment 2, the same animals were used, but at the time of dilution of semen was added 10 mM Trolox/20x106 sperm, or 2.25 mg of ascorbic acid/20x106 sperm, or even a combination of them. After thawing the analysis of motility, viability, sperm viability, acrosomal membrane integrity, mitochondrial activity cytochemical and spontaneous lipid peroxidation was performed. The experiment was conducted in a completely randomized design, and 2x2x4 factorial arrangement (2 breeds and 2 seasons and 4 antioxidants treatments). The motility, viability, acrosome integrity and mitochondrial activity were reduced with the addition of antioxidants (P<0,05) in particular the interaction between vitamin C and Trolox. Although the addition of antioxidants did not change the level of lipoperoxidation. The results can be explained by decreased levels of reactive oxygen species caused by antioxidants and a possible inhibition of signaling events such as sperm movement and activity of mitochondria, thus we can infer that the animals had not used vitamin deficiency and their demand, especially vitamin E, was met by supply.