| Summary: | Orientadora: Prof. Dr. Adair Roberto Soares dos Santos === Co-Orientadora : Profª Drª Maria Consuelo Andrade Marques === Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. Defesa: Curitiba, 06/04/2010 === Bibliografia: fls. 99-120 === Resumo: A b-glucana e um polissacarideo isolada do Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quel., um cogumelo comestivel conhecido no Japao como gusuhiratake h. Uma variedade de efeitos biologicos tem sido atribuida a essas glucanas, como propriedades antitumoral, antioxidante, anti-inflamatoria e imunomodulatoria. O presente estudo avaliou a atividade antinociceptiva e anti-inflamatoria da (1 ¨3),(1 ¨6) b-glucana (GL), verificando seus possiveis mecanismos de acao. O GL administrado pela via oral (v.o.) e intraperitoneal (i.p.) reduziu de forma dependente da dose a nocicepcao induzida pelo acido acetico. Alem disso, o GL (i.p.) tambem reduziu a migracao de celulas e extravasamento plasmatico apos a injecao de acido acetico. A nocicepcao induzida pela formalina tambem foi diminuida com a administracao do GL (i.p.). O tratamento com o GL reduziu a migracao de leucocitos, neutrofilos e mononucleares induzidos pela carragenina, alem de aumentar os niveis de IL-10. Entretanto, a antinocicepcao provocada pela GL nao foi afetada pelo tratamento dos animais com o antagonista opioide (naloxona) e nem foi associada a uma acao sedativa ou relaxante muscular, observado no teste do campo aberto. A antinocicepcao causada pelo GL no teste do acido acetico foi parcialmente revertida pelo pre-tratamento dos animais com toxina pertussis (inativador da proteina Gi/o). O tratamento (i.p.) dos animais com o GL tambem preveniram a nocicepcao induzida pela injecao intraplantar (i.pl.) de capsaicina, cinamaldeido, mentol e salina acida, mas nao quando co-administrado na pata com esses agonistas. Alem disso, foi demonstrado que as fibras sensoriais do tipo C e AƒÂ sensiveis a capsaicina estao parcialmente envolvidas na atividade antinociceptiva promovida pela glucana. A nocicepcao induzida pelo glutamato i.pl., bem como, a nocicepcao induzida pela injecao intratecal (i.t.) de AEE para receptores ionotropicos e da citocina pro-inflamatoria, IL-1b foram reduzidas com a administracao do GL. O GL foi efetivo em inibir tanto a nocicepcao quanto a ativacao da PKCƒÃ (atraves da analise de Western blot) induzida pela injecao i.pl. de PMA (ativador da PKC). O tratamento dos animais com o GL tambem diminuiu a imunorreatividade para GFAP de astrocitos da medula espinhal apos a inducao da nocicepcao pela formalina. O GL inibiu a alodinia mecanica induzida pela constricao do nervo ciatico em camundongos. Coletivamente, o presente trabalho demonstrou que o GL possui um interessante efeito antinociceptivo quando avaliada em varios modelos de nocicepcao aguda quimica e cronica em camundongos. Alem disso, o GL apresentou marcada acao anti-inflamatoria no modelo de peritonite induzida por carragenina. Os mecanismos de acao antinociceptiva e anti-inflamatoria do GL ainda estao sob investigacao, contudo, neste trabalho pode-se demonstrar que a inibicao da PKC e da ativacao astrocitaria e o aumento dos niveis de IL-10 estao envolvidos na acao antinociceptiva e anti-inflamatoria do GL. === Abstract: b-glucan is a polysaccharide isolated from Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quel., an edible mushroom known as gusuhiratake h in Japan. A variety of biological effects have been ascribed to b-glucans, namely antitumoral, antioxidant, antiinflammatory and immunomodulatory properties. The present study assessed the possible antinociceptive and anti-inflammatory action of the (1 ¨3),(1 ¨6) b- glucana (GL), evaluating its possible mechanisms of action. The oral (p.o.) and intraperitoneal (i.p.) administration of GL reduced in a dose-dependent manner the nociception induced by acetic acid. Besides, GL (i.p.) also reduced the cellular migration and plasmatic extravasation after acetic acid injection. The formalininduced nociception was inhibited by GL administration (i.p.). GL treatment reduced the leukocyte migration, neutrophils and mononuclears induced by carrageenan, and increased the IL-10 levels. However, the antinociception caused by the GL was not affected by intraperitoneal treatment of mice with naloxone (a
non-selective opioid receptor antagonist) and was not associated with nonspecific effects such as muscle relaxation or sedation, observed in the open-field test. The antinociception caused by GL in the acetic acid test was partially reverted by Gi/o protein inactivation (pertussis toxin treatment). I.p. treatment of animals with GL also prevented the nociception induced by intraplantar (i.pl.) injection of capsaicin, cinnamaldehyde, menthol and acidified saline, but not when these agonists were co-administered with GL. Therefore, the capsaicin-sensitive C-fibers seem partially play a critical role in the antinociception caused by the glucan. The nociception induced by glutamate (i.pl.) and by NMDA, AMPA, kainate and IL-1ƒÀ intrathecal (i.t.) injections were reduced GL administration. the administration of GL reduced the nociception induced by i.pl. injection of PMA. Western blot analysis revealed that GL treatment fully prevented PKCƒÃ activation by PMA in mice hindpaw. The treatment with GL also reduced the GFAP immunoreactivity of astrocytes from
spinal cord after the formalin-induced nociception. Finally, the GL also reduced mechanical allodynia evaluated by von Frey monofilament fibers, induced by partial sciatic nerve injury neuropathy. Collectively, this present study showed that GL has an interesting antinociceptive and anti-inflammatory effect. The precise mechanisms through which GL exerts its action are currently under investigation, but the present study showed that the inhibition of PKC and astrocytes activation and the increasing IL-10 levels are involved in the antinociceptive and antiinflammatory action of GL.
|
|---|
