| Summary: | === Beyond the classical actions of the renin-angiotensin system on the regulation of cardiovascular homeostasis, previous studies have shown its involvement in acute and chronic inflammation. While several evidences have shown the proinflammatory effects mediated by AT1 receptor activation through Angiotensin II (Ang II), less is known about the role of Mas receptor on inflammation. The aim of this work was to evaluate the cerebral and systemic inflammatory response induced by LPS, in Mas deficient animals (Mas-/-). Mas-/- and C57BL/6 wild-type (WT) mice (8-12 weeks-old) were challenged by intraperitoneal injection of LPS (5 mg/kg) and the inflammatory evaluations were performed 3 and 24 hours after LPS administration. Clinically, LPS induced pronounced body weight loss, hypotension and hypothermia which was more intense in Mas-/- mice compared to WT. Regarding neuroinflammatory parameters, Mas-/- mice had a significant increase in the number of adherent leukocytes on the brain endothelial cells compared to WT and more monocytes and neutrophils were recruited to the pia-mater in this group. The greater number of adherent leukocytes to the brain microvasculature in Mas-/- mice was associated with increased brain expression of IL-1 3h after LPS injection, as well as increased expression of neutrophil and monocytes chemoattractants, CXCL-1/KC, CXCL2/MIP-2 and MCP-1 24h later. Microglial activation was observed 24h after LPS injection, in a similar way for Mas-/- and WT mice. Regarding systemic inflammation, the plasmatic levels of IL-1 and IL-10 (3h after LPS), as well as chemokines CXCL1/KC and MCP (24h later) were increased in Mas-/- compared to WT mice. As neutrophils and monocytes were recruited to cerebral microvasculature, these cell populations were evaluated in the blood and in the bone marrow. 3h after LPS injection, the mice presented an important decrease in the number of neutrophils and monocytes in the blood. Similarly, LPS induced a pronounced decrease in the number of leukocytes in the bone marrow. The decrease was accentuated in Mas-/- mice, which presented a lower number of neutrophils and monocytes in the bone marrow, 3h and 24h after LPS challenge, respectively, suggesting increased leukocytes mobilization from bone marrow. Mas-/- mice presented increased CD11b expression on neutrophils and monocytes from bone marrow, after LPS injection, which indicates increased leukocyte activation when compared to WT. The increased expression of CD11b could be a molecular mechanism associated to increased leukocyte adhesion on brain microvasculature observed in Mas-/- mice, once CD11b is a molecule able to mediate the firm adhesion of leukocytes to endothelial cells. In conclusion, genetic deletion of Mas receptor appears to be associated with exacerbated inflammation in LPS-challenged Mas-/- mice, indicating an important role for this receptor in the regulation of cerebral and systemic inflammatory response induced by LPS. === Além das ações clássicas do sistema renina-angiotensina sobre a regulação da homeostase cardiovascular, estudos prévios têm demonstrado o envolvimento deste sistema na resposta inflamatória aguda e crônica. Enquanto inúmeras evidências demonstram os efeitos pró-inflamatórios mediados pela ativação do receptor AT1 através da Angiotensina II (Ang II), pouco se sabe sobre o envolvimento do receptor Mas em processos inflamatórios. O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta inflamatória cerebral e sistêmica induzida por lipopolissacarídeo (LPS) em animais geneticamente deficientes para o receptor Mas (Mas-/-). Camundongos Mas-/- e C57BL/6 selvagens (WT), com 8 a 12 semanas de idade, foram desafiados com uma injeção intraperitoneal de LPS (5mg/Kg), sendo as avaliações realizadas 3 horas (3h) e 24 horas (24h) após a administração de LPS. Clinicamente, o LPS induziu importante perda de peso, hipotensão e hipotermia, a qual foi mais intensa nos animais Mas comparados aos WT. Em relação aos parâmetros neuroinflamatórios, os camundongos Mas-/- apresentaram aumento significativo no número de leucócitos aderidos na microvasculatura cerebral e maior recrutamento de monócitos e neutrófilos para a pia-máter se comparados aos WT tanto 3h quanto 24h após o desafio. Estes resultados foram associados à maior expressão cerebral de IL-1 3h após a injeção de LPS, bem como à maior expressão de fatores quimiotáticos para neutrófilos e monócitos, CXCL-1/KC, CXCL2/MIP-2 e MCP-1 no tempo 24h. Alterações morfológicas indicativas de ativação de micróglia foram observadas 24h após administração de LPS, de uma forma similar em animais Mas-/- e WT. Em relação aos parâmetros sistêmicos, os níveis plasmáticos de IL-1 e IL-10 (3h após o LPS), bem como de quimiocinas CXCL1/KC e MCP-1 (24h após o LPS) estavam aumentados em camundongos Mas-/- comparados aos WT. Considerando que neutrófilos e monócitos foram recrutados para microcirculação cerebral, essas populações celulares foram avaliadas no sangue e na medula óssea. Três horas após o desafio com LPS, todos os camundongos apresentaram importante redução no número de neutrófilos e monócitos no sangue. Similarmente, foi observada intensa redução no número de leucócitos na medula óssea. Essa redução foi mais marcante nos camundongos Mas-/-, os quais apresentaram menor número de neutrófilos e monócitos na medula óssea 3h e 24h após o desafio com LPS, respectivamente, sugerindo aumento na mobilização de leucócitos a partir da medula óssea nesse grupo de animais. Camundongos Mas-/- apresentaram maior expressão de CD11b em neutrófilos e monócitos da medula óssea após a administração de LPS, o que denota maior ativação leucocitária nesses animais quando comparados aos WT. O aumento na expressão de CD11b pode ser um mecanismo molecular associado ao aumento da adesão leucocitária sobre a microvasculatura cerebral observada nos camundongos Mas-/-, uma vez que esta é uma molécula capaz de mediar a firme adesão de leucócitos às células endoteliais. Em conclusão, a deleção genética do receptor Mas apresentou-se associada com uma resposta inflamatória exacerbada nos camundongos Mas-/- desafiados com LPS, demonstrando assim o importante papel deste receptor na regulação de resposta inflamatória cerebral e sistêmica induzida por LPS.
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