ANÁLISE DA MUTAÇÃO V600E DO GENE BRAF E DETECÇÃO IMUNO-HISTOQUÍMICA DA PROTEÍNA BRAF EM CARCINOMAS PAPILÍFEROS DE TIREÓIDE

• Main Author: Silva, Rosana Correa da
• Other Authors: Saddi, Vera Aparecida
• Format: Others
• Language: Portuguese
• Published: Pontifícia Universidade Católica de Goiás 2016
• Subjects: BRAF; mutação V600E; proteína BRAF; Carcinoma papilífero de tireóide; V600E mutation; BRAF-protein; thyroid papillary carcinoma; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
• Online Access: http://localhost:8080/tede/handle/tede/2345

Made available in DSpace on 2016-08-10T10:38:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ROSANA CORREA DA SILVA.pdf: 1155135 bytes, checksum: a1c142c1de3c5263b64fc25cab61f452 (MD5) Previous issue date: 2012-03-28 === Papillary carcinomas are the most common tumors of the thyroid, corresponding to 80% of all tumors that affect the gland. In such tumors, a common mutation at the BRAF gene has been detected, comprising a nucleotide transversion, T1799A, at the exon 15 of gene. This mutation has been identified in about 50 % of the thyroid papillary carcinomas (TPC). Clinical and experimental studies have demonstrated important associations between BRAF mutations and different TPC clinical factors related to tumor progression, invasion and recurrence. The objective of this study was to analise BRAF protein expression, by using immunohistochemistry, and V600E BRAF mutations in a group of patients with thyroid papillary carcinoma. BRAF protein expression and V600E BRAF mutations were compared to TPC clinical and pathological aspects. The study group comprised 116 TPC patients that were selected at the Pathology Department of Hospital Araujo Jorge, in Goiânia. BRAF immunohistochemical analysis employed a labeled polymer peroxidase method and primary BRAF monoclonal antibody (clone F-7), Santa Cruz Biotechnology Inc. BRAF V600E molecular analysis was carried by PCR (Polimerase Chain Reaction) associated to RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Statistical analysis was performed by using univariate analysis (Chi-square test with Yates correction, and Fischer). Our results indicated that BRAF overexpression was detected in 54 TPC cases (46.0%), while BRAF V600E mutation was detected in 74 TPC cases (63.8%). Significant associations were detected between BRAF overexpression with distant metastasis (p=0.001) and tumor extrathyroidal extensions (p=0.0183). BRAF V600E mutations were significantly associated with lymph nodes methastasis (p=0.0385) and BRAF protein overexpression (p=0.0063). === Os carcinomas papilíferos são os tumores mais comuns da tireóide, sendo responsáveis por 80% de todos os cânceres da glândula. Nesses tumores, uma mutação comum no gene BRAF tem sido observada, compreendendo a transversão do nucleotídeo T1799A, localizado no exon 15, verificada em 50% dos carcinomas papilíferos de tireóide (CPT). Essa mutação acarreta a substituição do aminoácido valina na posição 600 da proteína, por ácido glutâmico, sendo assim designada V600E. Estudos experimentais e clínicos têm mostrado uma associação entre a mutação do gene BRAF e diferentes parâmetros clínicos de progressão, invasão e recorrência no CPT. O objetivo deste estudo foi detectar os níveis da proteína BRAF utilizando o método de imuno-histoquímica, e avaliar a mutação V600E do gene BRAF em um grupo de pacientes com carcinoma papilífero de tireóide. A detecção imuno-histoquímica da proteína BRAF e a mutação V600E do gene BRAF, foram comparadas em relação aos aspectos clínico-patológicos dos tumores. O grupo de estudo incluiu 116 pacientes com carcinoma papilífero de tireóide, selecionados no Setor de Anatomia Patológica do Hospital Araújo Jorge, em Goiânia-GO. A análise imuno-histoquímica utilizou o método da imunoperoxidase associada a polímeros e o anticorpo BRAF (clone F-7) Santa Cruz Biotechnology Inc. A análise molecular da mutação V600E do gene BRAF foi realizada por meio de PCR (reação em cadeia da polimerase) e RFLP (polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição). As análises estatísticas incluiram o teste do Chi-quadrado com correção de Yates e o teste exato de Fisher. Nossos resultados mostraram que a hiperexpressão de BRAF foi detectada em 54 casos (46%) e a mutação V600E do gene BRAF em 74 casos (63,8%). Dentre as associações investigadas, resultados significativos foram observados entre a hiperexpressão da proteína BRAF e extensão extra-tireoideana do tumor (p=0,0183). A presença da mutação V600E do gene BRAF foi associada as metástases linfonodais (p=0,0385) e à hiperexpressão da proteína BRAF (p=0,0063).