Induktion der Eicosanoide bei Gesunden und Patienten mit Sepsis

• Main Author: Ludwig, Ute
• Other Authors: Universität Leipzig, Institut für Klinische Chemie, Laboratoriumsmedizin und molekulare Diagnostik
• Format: Doctoral Thesis
• Language: deu
• Published: Universitätsbibliothek Leipzig 2016
• Subjects: sepsis eicosanoide massenspektrometrie; sepsis eicosanoids mass spectrometry; ddc:600; Septischer Schock; Arachidonsäure; LC-MS/MS
• Online Access: http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bsz:15-qucosa-192562; http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bsz:15-qucosa-192562; http://www.qucosa.de/fileadmin/data/qucosa/documents/19256/Dissertation%20Ute%20Ludwig%2015.12.2015.pdf

Ziel der vorliegenden Promotionsarbeit war die Untersuchung von Sepsis-assoziierten Veränderungen des Arachidonsäure (AA)-Metabolismus und die Identifikation differentiell regulierter AA-Metabolite mit Prüfung ihres diagnostischen Potentials bei Patienten mit Sepsis unter Anwendung eines in-vitro Lipopolysaccharid (LPS) Vollblutaktivierungs-Modells. In Zellüberständen von nicht-aktiviertem und LPS-aktiviertem Heparinblut (25 Sepsis- Patienten, 15 Gesunde) wurden AA-Metabolite mittels Flüssigkeitschromatographie-Tandem- Massenspektrometrie analysiert. In einer unabhängigen Kohorte (10 Sepsis-Patienten, 3 Gesunde) wurden nach RNA-Isolation aus Zellmaterial zusätzlich Target-Gene des AAMetabolismus (Cyclooxygenase (COX)-2 und mikrosomale Prostaglandin-E-Synthase (mPGES)-1 mittels quantitativer Reverse Transkriptase-Polymerase Kettenreaktion (RT-PCR) untersucht. Es konnte eine differentielle Freisetzung von AA, AA-Analoga und der COX-assoziierten Metabolite Prostaglandin (PG) E2, 11-Hydroxyeicosatetraensäure (HETE) und Thromboxan (TX) B2 zwischen Patienten und gesunden Kontrollpersonen gezeigt werden. Sepsis-Patienten wiesen dabei gegenüber Gesunden eine deutlich reduzierte Freisetzung von AA und den COXassoziierten Metaboliten 11-HETE und PGE2 auf. Das Ausmaß der reduzierten Mediatorenfreisetzung bei Sepsis-Patienten war mit der Schwere der Erkrankungssymptomatik und dem klinischen Outcome assoziiert. Auf Genexpressionsebene zeigte sich eine reduzierte Induzierbarkeit der COX-2 mRNA-Expression bei Sepsis-Patienten gegenüber Gesunden, jedoch eine erhaltene Induzierbarkeit auf der Ebene der mPGES-1.