Untersuchung zum Auftreten genetischer Varianten im CYP2D6-Gen bei Patienten mit postoperativer(m) Übelkeit und/ oder Erbrechen

• Main Author: Mühlmann-Gerlach, Konstanze
• Other Authors: Rüffert, Henrik
• Format: Doctoral Thesis
• Language: German
• Published: 2012
• Subjects: info:eu-repo/classification/ddc/610; ddc:610; CYP2D6,PONV; PONV
• Online Access: http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bsz:15-qucosa-90134; https://ul.qucosa.de/id/qucosa%3A11460; https://ul.qucosa.de/api/qucosa%3A11460/attachment/ATT-0/

Postoperative Übelkeit und/oder Erbrechen (PONV: postoperative nausea and/or vomiting) stellen mit einer Inzidenz von etwa 30-80% eine häufige und für den Patienten unangenehme Nebenwirkung von Narkosen dar, die zu schweren postoperativen Komplikationen führen können und nicht unerhebliche Kosten für das Gesundheitssystem verursachen. Zur medikamentösen PONV-Prophylaxe werden u.a. die vom sog. CYP2D6-Enzym metabolisierten 5HT3A-Antagonisten verwendet. Das CYP2D6 ist ein hochpolymorphes Enzym aus der Cytochrom-P450 Familie. Mittlerweile sind ca. 80 Allele bekannt, die unterschiedliche Enzymaktivitäten repräsentieren. Man unterscheidet eine hohe Enzymaktivität beim Extensive Metabolizer (EM) vom Poor Metabolizer (PM) mit fehlender Enzymaktivität. Der Intermediate Metabolizer (IM) besitzt eine niedrige Enzymaktivität und der Ultrarapid Metabolizer (UM) hat eine sehr hohe Enzymaktivität. Ziel der vorliegenden Arbeit war die CYP2D6-Genotypisierung von PONV-Patienten, die abhängig von ihrer PONV-Risikostratifizierung eine Emesisprophylaxe erhielten oder nicht. Zur Genotypisierung wurde bei 97 Patienten das komplette CYP2D6-Gen sequenziert. Bei der Suche nach genetischen Varianten wurden auch nicht-kodierende Intronbereiche eingeschlossen. Zusätzlich wurden PCR-Assays zur Prüfung auf eventuelle CYP2D6-Duplikationen und –Deletionen angewandt. Nachfolgend wurden die ermittelten Genotypen durch ein Punktwertsystem einem Phänotyp zugeordnet. Bezüglich der Fragestellung der Wirksamkeit einer applizierten PONV-Prophylaxe in Abhängigkeit der vom Genotyp abgeleiteten individuellen Metabolisierungskapazität erfolgten statistische Gruppenanalysen nach Auftreten oder Nicht-Auftreten von PONV. Hierbei sollten ergänzende Informationen zur praktischen Anwendung im anästhesiologischen Sektor und mögliche Prädiktoren für PONV herausgearbeitet werden.:Inhaltsverzeichnis BIBLIOGRAPHISCHE BESCHREIBUNG C REFERAT C I ABKÜRZUNGSVERZEICHNIS F II ABBILDUNGSVERZEICHNIS H III TABELLENVERZEICHNIS J 1. EINLEITUNG 1 1.1. PONV 1 1.1.1. Definition 1 1.1.2. Pathophysiologie des Erbrechens 1 1.1.3. Bedeutung von PONV 2 1.1.4. PONV-Risikofaktoren 2 1.1.5. PONV-Prophylaxe 4 1.2. PHARMAKOGENETIK 5 1.3. DAS CYTOCHROM P450 SYSTEM 6 1.3.1. Das Cyp 2D6 6 1.3.4. Genort und Regulierung des CYP2D6 8 1.3.5. CYP2D6 Allele und ihre Metabolisierungskapazität 10 1.4. PHÄNOTYPISIERUNG DES CYP2D6 11 2. MATERIAL UND METHODEN 13 2.1. STUDIENDESIGN 13 2.2. EDV 13 2.3. GERÄTE 14 2.4. METHODIK 14 2.4.1. DNA – Extraktion aus Vollblut 15 2.4.2. Die Polymerase-Kettenreaktion 16 2.4.3. Genotypisierung von CYP2D6 17 2.4.4. PCR-Duplikation 23 2.4.5. PCR-Deletion 25 2.5. PRÄDIKTION DES RESPONSEVERHALTENS ÜBER DEN GENOTYP 27 3. ERGEBNISSE 29 3.1. PATIENTENCHARAKTERISIERUNG 29 3.2. ERGEBNISSE GENOTYPISIERUNG CYP2D6 30 3.2.1 Nachgewiesene genetische Varianten im CYP2D6 Gen 30 3.2.2 Häufigkeitsverteilung der detektierten CYP2D6-Allele 32 3.2.3 Genotypen und Metabolisierungskapazität 33 3.3. AUSMAß VON PONV NACH APPLIZIERTER ANTIEMETHISCHER THERAPIE MIT ONDANSETRON UND DEXAMETHASON 36 3.3.1. Analyse der Gruppe ohne PONV-Prophylaxe (Gruppe 0) 37 3.3.2. Gruppe mit PONV-Prophylaxe (Gruppe 1) 41 3.3.3. Auftreten von PONV unabhängig einer applizierten Emesisprophylaxe im gesamten Patientengut 46 3.4. ANALYSE MÖGLICHER PRÄDIKTOREN FÜR PONV 50 4. DISKUSSION 52 5. ZUSAMMENFASSUNG 69 LITERATURVERZEICHNIS I ANHANG XI PRIMERHERSTELLUNG XI HERSTELLUNG DNTP´S XI HERSTELLUNG DES LADDERS XI HERSTELLUNG VON 10XBROMPHENOLBLAU XI HERSTELLUNG VON 0,5 M EDTA XI HERSTELLUNG VON 10X-TE-PUFFER XI HERSTELLUNG VON 10X-TBE-PUFFER (TRIS-BORAT-PUFFER) XII HERSTELLUNG DES AGAROSEGELS (1%) XII PRIMER P100/200 UND SEQUENZIERPRIMER XII VERWENDETE PRIMER XVII AUSGEWÄHLTE SEQUENZKURVENAUSSCHNITTE DER NACHGEWIESENEN SNP´S XVIII POLYMORPHISMUS (STELLENANGABEN NACH KIMURA ET AL., 1989, M33388) XVIII BEMERKUNGEN XVIII ERKLÄRUNG ÜBER DIE EIGENSTÄNDIGE ABFASSUNG DER ARBEIT XXV DANKSAGUNG XXVI