Préparation d'haptènes de la vitamine D et obtention d'anticorps monoclonaux anti 25 hydroxyvitamine D pour la mise au point d'un immunodosage simultané des deux 25 hydroxyvitamines D2 et D3

• Main Author: Penlou, Sébastien
• Language: FRE
• Published: Université Claude Bernard - Lyon I 2004
• Subjects: [CHIM:ORGA] Chemical Sciences/Organic chemistry; [CHIM:ORGA] Chimie/Chimie organique; vitamine D; haptènes 25-hydroxyvitamines D2 et D3; immunodosage; anticorps anti-25-hydroxyvitamine D; traceurs
• Online Access: http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00952865; http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/95/28/65/PDF/2014-02-27_ThA_se_SA_bastien_PENLOU_2004_Recto-Verso.pdf

Dans le but d'accéder à un radioimmunodosage simultané des 25-hydroxyvitamines D2 et D3, qui sont un bon indicateur de la quantité de vitamine D disponible dans l'organisme, 5 haptènes de la vitamine D de chaînons variables à fonction acide carboxylique terminale ont été préparés par hémisynthèse à partir de la chaîne latérale de la vitamine D2. Ces 5 haptènes ont été couplés à la sérum albumine bovine pour immuniser des souris, des rats et des lapins ou bien à l'histamine pour donner des traceurs radioactifs, marqués par l'iode (125I). Les animaux ont bien répondu en sécrétant des anticorps dirigés contre les deux 25-hydroxyvitamines D2 et D3 avec des reconnaissances presque identiques. Les cellules spléniques de 3 de ces rats ont pu être fusionnées avec un myélome de souris afin de les immortaliser. Deux hybridomes sécréteurs d'anticorps monoclonaux qui reconnaissent les deux vitamines similairement et ne croisent pas avec l'hormone 1α,25-dihydroxyvitamine D ont pu être sélectionnés.