EXPRESSION, PURIFICATION ET ÉTUDE STRUCTURALE PAR RMN DE PEBP DE DROSOPHILE

• Main Author: Gilles, Rautureau
• Language: FRE
• Published: Université d'Orléans 2006
• Subjects: [SDV:OT] Life Sciences/Other; Résonance Magnétique Nucléaire; structure; dynamique; modélisation moléculaire; PEBP; Drosophila melanogaster; expression; purification<br />Expression; purification and NMIR structural study of PEBPs from Drosophila Abstract
• Online Access: http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00139424; http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/13/94/24/PDF/these_rautureau_2006.pdf

Les Phosphatidylethanolamine Binding Proteins (PEBP) sont des protéines d'environ 20 kDa conservées depuis les bactéries jusqu'aux mammifères. Elles sont caractérisées par leur capacité de fixer des ligands anioniques. Les PEBP agissent dans un grand nombre de processus cellulaires (notamment au niveau des voies de transduction du signal), et de processus physiologiques (comme la spermatogénèse) de l'organisme sain. Par ailleurs des modifications de l'expression de ces protéines sont corrélées à des situations pathologiques comme les cancers primaires et métastatiques, le diabète, la maladie d'Alzheimer et l'infertilité. Il existe 7 PEBP chez la drosophile. Durant ce travail de thèse nous avons exprimé 3 d'entre elles chez Escherichia coli et mis au point les protocoles pour les purifier en grande quantité. Parmi les protéines produites, la protéine CG7054 a été choisie pour une étude structurale par RMN. Nous avons réalisé l'attribution des signaux 'H, 13C et 'Shi du squelette peptidique et des chaînes latérales de cette protéine. L'étude de la dynamique de son squelette peptidique a été réalisée et sa structure 3D a été déterminée et analysée.