Confinement moléculaire et organisation de la membrane des cellules vivantes: analyse de la diffusion par spectroscopie de corrélation de fluorescence

Dans la description actuelle de la membrane plasmique, des hétérogénéités ou des mécanismes sont supposés empêcher la libre diffusion des particules membranaires. La diffusion des protéines transmembranaires serait ainsi ralentie par le réseau d'actine du cytosquelette, alors que les microdomai...

Full description

Bibliographic Details
Main Author: Wawrezinieck, Laure
Language:FRE
Published: Université de la Méditerranée - Aix-Marseille II 2006
Subjects:
Online Access:http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00097010
http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/09/70/10/PDF/2006_PhDthesis_wawrezinieck.pdf
http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/09/70/10/ANNEX/fence_model_2.avi
http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/09/70/10/ANNEX/picket_model.avi
http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/09/70/10/ANNEX/Singer_Nicholson_model.avi
http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/09/70/10/ANNEX/2006_soutenance_wawrezinieck.ppt
Description
Summary:Dans la description actuelle de la membrane plasmique, des hétérogénéités ou des mécanismes sont supposés empêcher la libre diffusion des particules membranaires. La diffusion des protéines transmembranaires serait ainsi ralentie par le réseau d'actine du cytosquelette, alors que les microdomaines lipidiques confineraient transitoirement les molécules impliquées dans les voies de signalisation.<br />La spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS) est une technique puissante permettant de mesurer des coefficients de diffusion. L'étude devient cependant malaisée lorsque la diffusion n'est pas libre, comme c'est le cas des composantes de la membrane cellulaire. <br />Nous avons montré que la réalisation de mesures FCS à différentes tailles de volumes d'observation permet de tracer les lois de diffusion des molécules dans les membranes des cellules vivantes. Notre méthode permet ainsi de distinguer entre différentes structures de confinement des particules de la membrane plasmique et de mesurer certaines de leurs caractéristiques, comme leur taille ou le temps de confinement moyen. Il a également été possible d'étudier la réorganisation de la membrane cellulaire au cours d'un événement de signalisation.