| Summary: | Amaç: Bruton’s tirozin kinaz (Btk) , B lenfositlerinin gelişimi,
proliferasyonu ve B hücre serilerinin farklılaşmasında, B hücre reseptörü (BCR)
aracılı sinyal iletiminde kritik rol oynadığı bilinmektedir. Bu çalışmada
PRIMA-1’in Btk aktivitesi üzerindeki antitumor etkisi ve altta yatan apopitoz
mekanizması araştırılmıştır. Gereç ve
Yöntem: KBM3 ve Namalwa hücrelerinde Btk ekpresyon
seviyesi üzerine PRIMA 1’in etkisini kontrol etmek için kantitatif real time
PCR ve Western Blot analizi yapılmıştır. FACS ve flouresan mikroskobi
kullanılarak apoptozda Btk ‘nın rolünü belirlemek için, wild tip Btk ve Btk-NLS
( Nükleus hedefli Btk) ekpresyon plazmidleri COS-7 hücrelerine transfekte
edildi.Bulgular: Bu çalışmada, akut myelomonositik lösemi hücrelerine anti lösemik
ilaç uygulanması sonucunda, Btk ekspresyonun mRNA ve protein seviyesinde
baskılanmasını gözlemledik. Böylece Nrf2 ve HO-1 proteinlerinin
ekpresyonlarında bir azalma olduğunu da farkettik. Dikkat çekici bir şekilde
Btk nükleer lokalizasyonu, düşük dozda PRIMA-1 uygulaması ile artıyorken,
yüksek dozda PRIMA -1 uygulaması ile Btk ekspresyonu baskılanıyor. Buna ek
olarak, wild tip Btk ile kıyaslandığında, nükleer hedefli aşırı
ekspresyonda, apoptozisde azalma ve hücre canlılık oranında artış ile
sonuçlanıyor.
Sonuç:
Bulgularımıza göre, PRIMA-1 uygulaması ile Nrf2 ve
HO-1 oksidatif cevap aracılığı ile nükleer Btk, hücre apoptozunu azalmaktadır.
|
|---|
