TRIAGEM NEONATAL DE IMUNODEFICIÊNCIAS GRAVES COMBINADAS POR MEIO DE TRECS E KRECS: SEGUNDO ESTUDO PILOTO NO BRASIL

• Main Authors: Marilia Pyles P. Kanegae, Lucila Akune Barreiros, Jusley Lira Sousa, Marco Antônio S. Brito, Edgar Borges de Oliveira Junior, Lara Pereira Soares, Juliana Themudo L. Mazzucchelli, Débora Quiorato Fernandes, Sonia Marchezi Hadachi, Silvia Maia Holanda, Flavia Alice T. M. Guimarães, Maura Aparecida P. V. V. Boacnin, Marley Aparecida L. Pereira, Joaquina Maria C. Bueno, Anete Sevciovic Grumach, Regina Sumiko W. Di Gesu, Amélia Miyashiro N. dos Santos, Newton Bellesi, Beatriz T. Costa-Carvalho, Antonio Condino-Neto
• Format: Article
• Language: English
• Published: Sociedade de Pediatria de São Paulo
• Series: Revista Paulista de Pediatria
• Subjects: Severe combined immunodeficiency (SCID); Agammaglobulinemia; Newborn screening; Immunologic deficiency syndromes; Child
• Online Access: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-05822017000100025&lng=en&tlng=en

RESUMO Objetivo: Validar a quantificação de T-cell receptor excision circles (TRECs) e kappa-deleting recombination circles (KRECs) por reação em cadeia de polimerase (polymerase chain reaction, PCR) em tempo real (qRT-PCR), para triagem neonatal de imunodeficiências primárias que cursam com defeitos nas células T e/ou B no Brasil. Métodos: Amostras de sangue de recém-nascidos (RN) e controles foram coletadas em papel-filtro. O DNA foi extraído e os TRECs e KRECs foram quantificados por reação duplex de qRT-PCR. O valor de corte foi determinado pela análise de Receiver Operating Characteristics Curve, utilizando-se o programa Statistical Package for the Social Sciences (SSPS) (IBM®, Armonk, NY, EUA). Resultados: 6.881 amostras de RN foram analisadas quanto à concentração de TRECs e KRECs. Os valores de TRECs variaram entre 1 e 1.006 TRECs/µL, com média e mediana de 160 e 139 TRECs/µL, respectivamente. Três amostras de pacientes diagnosticados com imunodeficiência grave combinada (severe combined immunodeficiency, SCID) apresentaram valores de TRECs abaixo de 4/µL e um paciente com Síndrome de DiGeorge apresentou TRECs indetectáveis. Os valores de KRECs encontraram-se entre 10 e 1.097 KRECs/µL, com média e mediana de 130 e 108 KRECs/µL, e quatro pacientes com diagnóstico de agamaglobulinemia tiveram resultados abaixo de 4 KRECs/µL. Os valores de corte encontrados foram 15 TRECs/µL e 14 KRECs/µL, e foram estabelecidos de acordo com a análise da Receiver Operating Characteristics Curve, com sensibilidade de 100% para detecção de SCID e agamaglobulinemia, respectivamente. Conclusões: A quantificação de TRECs e KRECs foi capaz de diagnosticar crianças com linfopenias T e/ou B em nosso estudo, validando a técnica e dando o primeiro passo para a implementação da triagem neonatal em grande escala no Brasil.