Evaluación del potencial biotecnológico de un promotor derivado del virus de la distorsión de la hoja de maracuyá (PLDV), un begomovirus que infecta maracuyá

• Main Authors: Juan Carlos Vaca-Vaca, Emerson Clovis Carrasco-Lozano, Karina Lopez-Lopez
• Format: Article
• Language: Spanish
• Published: Universidad Nacional de Colombia 2019-01-01
• Series: Revista Colombiana de Biotecnología
• Subjects: Biobalística; expresión transitoria; gen uidA; mesófilo
• Online Access: https://revistas.unal.edu.co/index.php/biotecnologia/article/view/77636

Los avances biotecnológicos en plantas requieren la bioprospección de nuevos promotores para la expresión de genes de interésagronómico, en particular, es necesario caracterizar nuevos promotores con expresión tejido específica. El objetivo de esta investi-gación fue evaluar la actividad de expresión del promotor del gen AV1que codifica para la proteína de la cápside (CP) del virus de la distorsión de la hoja de maracuyá (Passion fruit leaf distortion virus,PLDV) mediante ensayos transitorios de biobalística de baja presión. Se realizó un análisis de la región promotora del gen AV1empleando herramientas bioinformáticas. Se construyó una fu-sión traduccional (CP-PLDV-GUS), que porta la región promotora del gen AV1de PLDV fusionada al gen reportero uidA(GUS). CP-PLDV-GUS fue bombardeado sobre hojas de plántulas de tabaco cultivadas in vitro empleando una pistola de genes. Como control positivo se utilizó el plásmido pBI121 que porta el gen GUS bajo el control del promotor 35S de CaMV. Se llevaron a cabo 11 re-peticiones, donde la unidad experimental fue la hoja y la variable de respuesta, la expresión transitoria del gen GUS representado por  el  número  de  puntos  azules  observados  en  las  hojas  bombardeadas.  Como  resultado, el  análisis  estadístico  no  paramétrico demostró que existe evidencia muestral suficiente para confirmar que, tanto el promotor AV1del PLDV y 35S de CaMV presentan una actividad de expresión semejante. Finalmente, el promotor del gen AV1de PLDV mostró una fuerte actividad de expresión del gen reportero en las células del mesófilo de las hojas, el cual podría ser usado para conferir expresión tejido específica enplantas transgénicas