A simplified CsCL protocol for lambda DNA purification: no enzymatic treatment/one phenol extraction

• Main Authors: Roberto V. Santelli, Luci Deise Navarro-Cattapan
• Format: Article
• Language: English
• Published: Sociedade Brasileira de Genética 2000-03-01
• Series: Genetics and Molecular Biology
• Online Access: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1415-47572000000100011

A modification of the CsCl gradient centrifugation method for DNA phage purification is presented. It avoids the enzymatic steps as well the need for a preliminary phage titration, a tedious process proposed in the majority of the protocols in use. The quality of the DNA obtained makes it amenable for additional manipulations like digestions, ligations, labelling, subcloning, etc.<br>É proposta uma modificação para o tradicional protocolo de purificação de DNA de fago que utiliza gradiente de cloreto de césio. Este método evita etapas enzimáticas assim como a necessidade de uma titulação prévia, um processo que consome tempo e é proposto na maioria dos métodos em uso. A qualidade do DNA obtido permite manipulações adicionais, tais como digestões, ligações, marcações, subclonagens, etc.