Determinação quantitativa de taninos em três espécies de Stryphnodendron por cromatografia líquida de alta eficiência

• Main Authors: Gisely Cristiny Lopes, Andréia Cristina Conegero Sanches, Cleyton Eduardo Mendes de Toledo, Ana Cristina Isler, João Carlos Palazzo de Mello
• Format: Article
• Language: English
• Published: Universidade de São Paulo 2009-03-01
• Series: Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences
• Subjects: Stryphnodendron adstringens; Stryphnodendron polyphyllum; Stryphnodendron obovatum; Cromatografia líquida de alta eficiência; Taninos; Análise quantitativa; High-performance liquid chromatograhy; Tannins; Quantitative analysis
• Online Access: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1984-82502009000100017

Um método de separação e quantificação por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em fase reversa foi desenvolvido usando água (0,05% de TFA):acetonitrila (0,05% de TFA) como fase móvel, em sistema gradiente para a análise dos flavan-3-óis presentes em extrato semipurificado das cascas de Stryphnodendron adstringens, Stryphnodendron polyphyllum e Stryphnodendron obovatum. A CLAE foi realizada com a fração acetato de etila (FAE) sendo submetida à extração em fase sólida (cartucho C18-E) com metanol:água (2:8), filtrada por membrana de porosidade 0,5 &#956;m; a pré-coluna e coluna empregadas foram Phenomenex® Gemini C-18 (5 &#956;m), com esta última mantida a 30 ºC, com vazão de 0,8 mL/min e detecção a 210 nm. Utilizaram-se soluções dos padrões de ácido gálico e galocatequina para a obtenção da curva analítica. O método proposto foi validado de acordo com a resolução RE n° 899/2003 da ANVISA. A análise quantitativa da FAE das três espécies mostrou que existe similaridade no teor de galocatequina. S. adstringens possui ácido gálico em uma proporção superior a 60% em relação às outras duas espécies. A metodologia desenvolvida mostrou-se viável à aplicação em plantas ricas em taninos, como nos casos de S. adstringens, S. polyphyllum e S. obovatum.<br>A method of separation and quantification by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) was developed, using water (0.05% TFA):acetonitrile (0.05% TFA) as the mobile phase in a gradient system. Flavan-3-ols present in a semipurified extract from the stem bark of Stryphnodendron adstringens, Stryphnodendron polyphyllum and Stryphnodendron obovatum were analyzed. The HPLC was performed with the ethyl-acetate fraction (EAF) using a solid-phase extraction on cartridges C18-E with methanol:water (2:8), filtered through a membrane of 0.5 &#956;m pore size; the column was Phenomenex® Gemini C-18 (5 &#956;m) at 30 ºC, with a flow rate of 0.8 mL/min. The analysis was done at 210 nm. Gallic acid and gallocatechin solutions were used as calibration standards. The proposed method was validated by resolution RE No. 899/2003 of the National Health Surveillance Agency. Quantitative analysis of the EAF showed high contents of flavan-3-ols in the stem bark of all three species. This study demonstrated that it is possible to determine the concentration of individual substances in tannin-rich plants. The system developed can be used as a chromatographic profile for the semipurified fraction of S. adstringens, S. polyphyllum, and S. obovatum.