Induction of symmetrical nucleus division and multi-nucleate structures in microspores of eggplant (Solanum melongena L.) cultured in vitro Indução de divisão nuclear simétrica e estruturas multinucleadas em micrósporos de berinjela (Solanum melongena L.) cultivados in vitro
A modification of a protocol used to induce tobacco microspore embryogenesis was tested in eggplant (Solanum melongena L.). In tobacco, uninucleate microspores are subjected to stress treatment by culturing in mannitol containing "B" medium at 33ºC for six days. The microspores are then tr...
Main Authors: | , , |
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Format: | Article |
Language: | English |
Published: |
Universidade de São Paulo
2009-08-01
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Series: | Scientia Agricola |
Subjects: | |
Online Access: | http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-90162009000400016 |
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doaj-8d14ac43b2114e3aa8dafe315fc1465f2020-11-24T23:22:31ZengUniversidade de São PauloScientia Agricola0103-90161678-992X2009-08-0166453553910.1590/S0103-90162009000400016Induction of symmetrical nucleus division and multi-nucleate structures in microspores of eggplant (Solanum melongena L.) cultured in vitro Indução de divisão nuclear simétrica e estruturas multinucleadas em micrósporos de berinjela (Solanum melongena L.) cultivados in vitroUgur BalSebnem EllialtiogluKazim AbakA modification of a protocol used to induce tobacco microspore embryogenesis was tested in eggplant (Solanum melongena L.). In tobacco, uninucleate microspores are subjected to stress treatment by culturing in mannitol containing "B" medium at 33ºC for six days. The microspores are then transferred to maltose containing AT3 medium for further development. In the experiment presented here late uninucleate and bi-nucleate microspores of the eggplant cultivar Bambino were pre-cultured in B medium and then incubated at +4ºC, 25ºC and 33ºC, respectively, for two days. After the pre-treatments, microspore cultures were transferred to AT3 medium containing 0.25 M maltose and maintained at 25ºC in the dark. Presence of symmetrical division and multinucleate structures was checked with DAPI staining of the nucleus after one and two weeks. Symmetrical division of the nucleus and multinucleate structures were observed only in uni-nucleate microspores pre-treated at 33ºC for two days. The frequency of multinucleate structures was 19.4% under these conditions. We demonstrated that eggplant is responsive to the modified tobacco protocol in the production of symmetrically division and multinucleate structures. These results may be used as a basis for adaptation fully of the tobacco system in eggplant.<br>Uma modificação de um protocolo utilizado para induzir embriogênese a partir de micrósporos de tabaco foi testada em berinjela (Solanum melongena L.). Em tabaco, micrósporos uninucleados são submetidos a um tratamento de estresse em meio "B" contendo manitol a 33ºC por seis dias. Os micrósporos são então transferidos para um meio AT3 contendo maltose para as fases posteriores de desenvolvimento. Neste estudo, micrósporos uninucleados e binucleados tardios do cultivar de berinjela Bambino foram pré-cultivados em meio "B" e, posteriormente, incubados a 4ºC, 25ºC e 33ºC por dois dias. Após os pré-tratamentos, as culturas de micrósporos foram transferidas para o meio AT3 contendo maltose 0,25 M e mantidas a 25ºC no escuro. A presença de divisão simétrica e estruturas multinucleadas foram verificadas com coloração DAPI do núcleo após uma e duas semanas. Foram observadas divisões simétricas dos núcleos e estruturas multinucleadas somente em micrósporos uninucleados, pré-tratados a 33ºC por dois dias. A frequência de estruturas multinucleadas foi de 19,4% sob essas condições. Nós demonstramos que a berinjela responde ao protocolo modificado de tabaco para produção de divisões simétricas e estruturas multinucleadas. Esses resultados podem ser utilizados como base para uma completa adaptação do sistema de tabaco em berinjela.http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-90162009000400016haplóidecultura de micrósporosdivisão simétricaestresse com manitolhaploidmicrospore culturesymmetrical divisionmannitol starvation |
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A modification of a protocol used to induce tobacco microspore embryogenesis was tested in eggplant (Solanum melongena L.). In tobacco, uninucleate microspores are subjected to stress treatment by culturing in mannitol containing "B" medium at 33ºC for six days. The microspores are then transferred to maltose containing AT3 medium for further development. In the experiment presented here late uninucleate and bi-nucleate microspores of the eggplant cultivar Bambino were pre-cultured in B medium and then incubated at +4ºC, 25ºC and 33ºC, respectively, for two days. After the pre-treatments, microspore cultures were transferred to AT3 medium containing 0.25 M maltose and maintained at 25ºC in the dark. Presence of symmetrical division and multinucleate structures was checked with DAPI staining of the nucleus after one and two weeks. Symmetrical division of the nucleus and multinucleate structures were observed only in uni-nucleate microspores pre-treated at 33ºC for two days. The frequency of multinucleate structures was 19.4% under these conditions. We demonstrated that eggplant is responsive to the modified tobacco protocol in the production of symmetrically division and multinucleate structures. These results may be used as a basis for adaptation fully of the tobacco system in eggplant.<br>Uma modificação de um protocolo utilizado para induzir embriogênese a partir de micrósporos de tabaco foi testada em berinjela (Solanum melongena L.). Em tabaco, micrósporos uninucleados são submetidos a um tratamento de estresse em meio "B" contendo manitol a 33ºC por seis dias. Os micrósporos são então transferidos para um meio AT3 contendo maltose para as fases posteriores de desenvolvimento. Neste estudo, micrósporos uninucleados e binucleados tardios do cultivar de berinjela Bambino foram pré-cultivados em meio "B" e, posteriormente, incubados a 4ºC, 25ºC e 33ºC por dois dias. Após os pré-tratamentos, as culturas de micrósporos foram transferidas para o meio AT3 contendo maltose 0,25 M e mantidas a 25ºC no escuro. A presença de divisão simétrica e estruturas multinucleadas foram verificadas com coloração DAPI do núcleo após uma e duas semanas. Foram observadas divisões simétricas dos núcleos e estruturas multinucleadas somente em micrósporos uninucleados, pré-tratados a 33ºC por dois dias. A frequência de estruturas multinucleadas foi de 19,4% sob essas condições. Nós demonstramos que a berinjela responde ao protocolo modificado de tabaco para produção de divisões simétricas e estruturas multinucleadas. Esses resultados podem ser utilizados como base para uma completa adaptação do sistema de tabaco em berinjela. |
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