Caracterização parcial de um Tymovirus isolado de tomateiros Partial characterization of a Tymovirus isolated from tomato

• Main Authors: Isabel Cristina Batista, Marcelo Eiras, Ricardo Harakava, Addolorata Colariccio
• Format: Article
• Language: English
• Published: Instituto Agronômico de Campinas 2012-01-01
• Series: Bragantia
• Subjects: Tymoviridae; Solanum lycopersicum; transmissão; semente; transmission; seed
• Online Access: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0006-87052012000200011
• ISSN: 0006-8705; 1678-4499

Um Tymovirus isolado de sementes de tomateiro (Solanum lycopersicum) 'Paronset' com sintomas de necrose, denominado TyToRS08, foi caracterizado quanto ao círculo de hospedeiras, propriedades físico-químicas, sorológicas e moleculares. O vírus foi transmitido mecanicamente a partir de folhas, frutos e sementes infectadas. A gama de hospedeiras incluiu espécies de Amaranthaceae, Chenopodiaceae e Solanaceae, induzindo sintomas local e sistêmicos na maior parte das espécies, exceto para Nicotiana sylvestris, N. tabacum 'Samsun', 'White Burley' e 'Xanthi' que não manifestaram sintomas. Em tomateiros 'Alambra', 'Thomas', 'Diva', 'Romana' e 'Graziela', o vírus induziu sintomas de mosaico e necrose branca. A presença do vírus foi detectada, nas sementes infectadas de todas as cultivares avaliadas, porém não se notou em plântulas após a germinação destas sementes. Foi obtida uma preparação purificada com concentração de 1,04 mg mL-1, empregada na produção de um antissoro policlonal que reagiu em PTA-ELISA com um título de 1/32768. Utilizou-se um par de oligonucleotídeos degenerados, desenhados para anelar na ORF 1 de espécies de Tymovirus, que permitiu a amplificação por RT-PCR de fragmentos com cerca de 700 pb. Após o alinhamento e a análise das sequências, verificou-se que o isolado TyToRS08 possuía valores abaixo de 70% de identidade com as espécies de Tymovirus, indicando que pode se tratar de uma espécie distinta das descritas no gênero, com potencial epidemiológico, pela sua estabilidade e disseminação por sementes de tomate.<br>A Tymovirus isolated from seeds of tomato (Solanum lycopersicum) cv. 'Paronset' with necrosis, named TyToRS08 isolate, was characterized by its host range, physical-chemical, serological and molecular properties. Firstly, it was successfully transmitted by mechanical inoculation by infected seeds, and the host range was restricted to species of Amaranthaceae, Chenopo diaceae and Solanaceae. The symptoms induced by the virus in tomatoes 'Alambra', 'Thomas', 'Diva', 'Romana' and 'Graziela' were mainly mosaic and white necrosis. Nicotiana sylvestris, N. tabacum 'Samsun', 'White Burley' and 'Xanthi' were symptomless. The virus was detected in seeds from five tomato cultivars, but it was not detected in seedlings from these infected seeds. The purified preparation had a high concentration of 1.04 mg mL-1, and the title of the polyclonal antiserum produced, evaluated in PTA-ELISA, was 1/32.768. RT-PCR was performed with degenerated primers directed to the ORF 1 of the tymoviruses, resulting in a DNA fragment of 700 bp. The sequence analysis revealed that TyToRS08 isolate presents higher values of percentage of identity with other species of Tymovirus. The highest identity values were under 70%, indicating that TyToRS08 should be a distinct species of the genus Tymovirus, with great epidemiological importance due to its high stability and potential to be spread by tomato seeds.