استفاده از Real time RT-PCR جهت شناسایی ویروس زبان آبی ایران

• Main Authors: عبدالحمید شوشتری, ف. جیرانی, همایون مهروانی, س.م. عظیمی
• Format: Article
• Language: English
• Published: Razi Vaccine and Serum Research Institute 2011-11-01
• Series: Archives of Razi Institute
• Subjects: real time PCR; RT; PCR; بیماری زبان آبی
• Online Access: http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103868_50d34787d139fb0e0ee4ae60b7fd0b06.pdf

طی سال های 1388-1389 از روش real time RT-PCR و RT-PCRمعمولی جهت شناسایی ویروس زبان آبی در 310 گوسفند مشکوک به بیماری زبان آبی استفاده شد. قطعاتS1 (ژن پلی مراز) و S10 (ژن NS3 ) بعنوان ژنهای حراست شده در گروه سرمی زبان آبی به ترتیب توسط rRT-PCRوRT-PCR معمولی مورد آزمایش قرار گرفتند و در نهایت تعداد 58 (18.6%) و 14 (4.5%) نمونه مثبت شناسایی شدند. جهت ارزیابی حساسیت rRT-PCR نسبت به RT-PCR معمولی از رقت های لگاریتمی RNA ویروس زبان آبی (BTV16) استفاده شد. نتایج حاکی از آن بود که با روش RT-PCR عیار بیش از TCID50/ml 103.8 قابل شناسایی است، در حالیکه در روش rRT-PCR مرز تشخیص در حد TCID50/ml 101.8 از RNA ویروس در نمونه های بالینی می باشد. در این مطالعه مشخص شد روش rRT-PCR از حساسیت فوق العاده ایی برخوردار است. دام‌هائی که در انتهای بیماری هستند و عیار ویروسی در خون آنها بسیار کاهش یافته است با این روش قابل شناسایی می‌باشند. دراین مطالعه سعی شد از برخی از نمونه های مثبت که باروش rRT-PCR شناسایی شدند، جداسازی ویروس صورت گیرد. برای این منظور از روش تزریق به عروق کوریوآلانتوئید تخم مرغ جنین دار و کشت سلول Vero و KC استفاده شد. علیرغم تلاش های صورت گرفته جداسازی ویروس امکان پذیر نشد.