بررسی سرولوژیک عفونت تجربی ناشی از توکسوپلاسما گوندئی در گربه با روش ایمنوبلات مبتنی بر آنتی ژن خالص شده سطحی

• Main Author: م. حسینی نژاد
• Format: Article
• Language: English
• Published: Razi Vaccine and Serum Research Institute 2012-12-01
• Series: Archives of Razi Institute
• Subjects: توکسوپلاسما گوندئی; ایمنوبلات; گربه
• Online Access: http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103901_3a5b342e3199a776036c20c6e1327869.pdf
• ISSN: 0365-3439; 2008-9872

توکسوپلاسما گوندئی، تک یاخته‌ای است که انسان و تقریبا همه حیوانات خون گرم آلوده می‌کند. چرخه زندگی انگل شامل یک سیکل تولید مثل غیر جنسی در میزبان‌های واسط (پستانداران و پرندگان) و یک سیکل تولید مثل جنسی در میزبان‌های نهایی (گربه سانان) می‌باشد. گربه‌ها، هم میزبان نهایی و هم میزبان واسط این تک یاخته هستند. هدف از این مطالعه، بررسی حضور پادتن‌های ایجاد شده در گربه‌ها، متعاقب عفونت با سویه Rh توکسوپلاسما گوندئی با استفاده از روش ایمنوبلات و بررسی کارایی روش ایمنوبلات طراحی شده با استفاده از آنتی‌ژن خالص سطحی (SAG1) حاصل از تکی زوآیت این تک یاخته در تشخیص بیماری بود. به این منظور، اقدام به ایجاد عفونت تجربی در گربه‌های سرم منفی، با استفاده از تزریق داخل صفاقی تکی زوآیت های تکثیر شده در محیط کشت سلول های Vero گردید. پس از آن، اقدام به ردیابی حضور پادتن‌های IgG با دو روش ایمنوبلات و تست پادتن درخشان غیر مستقیم گردید. در ایمنوبلات انجام شده با آنتی ژن خالص سطحی، خطوط مثبت در منطقه مربوط به پروتئین‌های 30 کیلو دالتونی در فاصله زمانی هشت روز پس از عفونت دیده شدند. خطوط مثبت در گروه کنترل که از محیط کشت حاوی Vero Cell های بدون تک یاخته دریافت کرده بودند دیده نشد. نتایج مثبت و منفی، با نتایج تست استاندارد IFAT در توافق کامل بودند. نتایج این بررسی نشان داد که ایمنوبلات طراحی شده بر مبنای یا آنتی ژن خالص سطحی، تست تشخیصی مناسبی جهت تشخیص سرولوژیک پادتن‌های ضد T. gondii در گربه‌هایی که به تازگی با این تک یاخته آلوده شده‌اند می‌باشد.