کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی

کلستریدیوم سپتیکوم یک باکتری گرم مثبت بی هوازی است که تعدادی توکسین از جمله آلفا، بتا، گاما و دلتا را تولید می کند. آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم کشنده بوده و مسئول بیماری بسیار خطرناک قانقرایای گازی است. هدف مطالعه حاضر کلونینگ ملکولی و توالی یابی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسینال(CN...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: احمد رضا جباری, سهیلا مرادی بیدهندی, پژواک خاکی, رضا پیله چیان لنگرودی, زهرا بزرگخو, محسن موسوی شوشتری
Format: Article
Language:English
Published: Razi Vaccine and Serum Research Institute 2014-05-01
Series:Archives of Razi Institute
Subjects:
Online Access:http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103929_92f18f93e1f3429dd0300f6bfb3c14bd.pdf
id doaj-602039747a084643a19b42c6297a5cb0
record_format Article
spelling doaj-602039747a084643a19b42c6297a5cb02020-11-24T21:22:15Zeng Razi Vaccine and Serum Research InstituteArchives of Razi Institute 0365-34392008-98722014-05-01691152010.7508/ari.2014.01.002103929کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلیاحمد رضا جباریسهیلا مرادی بیدهندیپژواک خاکیرضا پیله چیان لنگرودیزهرا بزرگخومحسن موسوی شوشتریکلستریدیوم سپتیکوم یک باکتری گرم مثبت بی هوازی است که تعدادی توکسین از جمله آلفا، بتا، گاما و دلتا را تولید می کند. آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم کشنده بوده و مسئول بیماری بسیار خطرناک قانقرایای گازی است. هدف مطالعه حاضر کلونینگ ملکولی و توالی یابی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسینال(CN913) است. از سوسپانسیون کشت شبانه باکتری، DNA ژنومیک به وسیله روش استاندارد فنل کلروفرم تخلیص و ژن آلفا توکسین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده و به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر شد. کمّیت و کیفیت محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از الکتروفورز ژل آگارز تعیین و به روش اسپکتروفوتومتری تائید گردید. محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز تخلیص ودر وکتورکلونینگ pJET1.2blunt لایگیت شد. سپس سلول مستعد E. coli/TOP10 به وسیله آن ترانسفورم گردید. پلاسمید نوترکیب pJETαsep از کلونE. coli/TOP10/pJETαsep تخلیص و ژن آلفا توکیسن به وسیلۀ پرایمرهای یونیورسال توالی یابی شد. توالی یابی و آنالیز بلاست ژن csa بیش از 99% تشابه را با سایر ژنهای csa موجود در بانک ژن نشان داد. این توالی با شماره JN793989 در بانک ژن ثبت گردید. از سویه E. coli/TOP10/pJETαsep می توان به عنوان یک کلون نوترکیب باکتریائی برای تخلیص ژن csa و بیان آن در میزبان مناسب استفاده نمود.http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103929_92f18f93e1f3429dd0300f6bfb3c14bd.pdfکلستریدیوم سپتیکومسویه واکسنژن آلفا توکسین(csa)کلونینگتوالی یابی
collection DOAJ
language English
format Article
sources DOAJ
author احمد رضا جباری
سهیلا مرادی بیدهندی
پژواک خاکی
رضا پیله چیان لنگرودی
زهرا بزرگخو
محسن موسوی شوشتری
spellingShingle احمد رضا جباری
سهیلا مرادی بیدهندی
پژواک خاکی
رضا پیله چیان لنگرودی
زهرا بزرگخو
محسن موسوی شوشتری
کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
Archives of Razi Institute
کلستریدیوم سپتیکوم
سویه واکسن
ژن آلفا توکسین(csa)
کلونینگ
توالی یابی
author_facet احمد رضا جباری
سهیلا مرادی بیدهندی
پژواک خاکی
رضا پیله چیان لنگرودی
زهرا بزرگخو
محسن موسوی شوشتری
author_sort احمد رضا جباری
title کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
title_short کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
title_full کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
title_fullStr کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
title_full_unstemmed کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
title_sort کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
publisher Razi Vaccine and Serum Research Institute
series Archives of Razi Institute
issn 0365-3439
2008-9872
publishDate 2014-05-01
description کلستریدیوم سپتیکوم یک باکتری گرم مثبت بی هوازی است که تعدادی توکسین از جمله آلفا، بتا، گاما و دلتا را تولید می کند. آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم کشنده بوده و مسئول بیماری بسیار خطرناک قانقرایای گازی است. هدف مطالعه حاضر کلونینگ ملکولی و توالی یابی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسینال(CN913) است. از سوسپانسیون کشت شبانه باکتری، DNA ژنومیک به وسیله روش استاندارد فنل کلروفرم تخلیص و ژن آلفا توکسین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده و به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر شد. کمّیت و کیفیت محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از الکتروفورز ژل آگارز تعیین و به روش اسپکتروفوتومتری تائید گردید. محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز تخلیص ودر وکتورکلونینگ pJET1.2blunt لایگیت شد. سپس سلول مستعد E. coli/TOP10 به وسیله آن ترانسفورم گردید. پلاسمید نوترکیب pJETαsep از کلونE. coli/TOP10/pJETαsep تخلیص و ژن آلفا توکیسن به وسیلۀ پرایمرهای یونیورسال توالی یابی شد. توالی یابی و آنالیز بلاست ژن csa بیش از 99% تشابه را با سایر ژنهای csa موجود در بانک ژن نشان داد. این توالی با شماره JN793989 در بانک ژن ثبت گردید. از سویه E. coli/TOP10/pJETαsep می توان به عنوان یک کلون نوترکیب باکتریائی برای تخلیص ژن csa و بیان آن در میزبان مناسب استفاده نمود.
topic کلستریدیوم سپتیکوم
سویه واکسن
ژن آلفا توکسین(csa)
کلونینگ
توالی یابی
url http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103929_92f18f93e1f3429dd0300f6bfb3c14bd.pdf
work_keys_str_mv AT ạḥmdrḍạjbạry ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly
AT shylạmrạdybydhndy ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly
AT pzẖwạḵkẖạḵy ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly
AT rḍạpylhcẖyạnlngrwdy ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly
AT zhrạbzrgkẖw ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly
AT mḥsnmwswysẖwsẖtry ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly
_version_ 1725996650882662400