کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی
کلستریدیوم سپتیکوم یک باکتری گرم مثبت بی هوازی است که تعدادی توکسین از جمله آلفا، بتا، گاما و دلتا را تولید می کند. آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم کشنده بوده و مسئول بیماری بسیار خطرناک قانقرایای گازی است. هدف مطالعه حاضر کلونینگ ملکولی و توالی یابی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسینال(CN...
Main Authors: | , , , , , |
---|---|
Format: | Article |
Language: | English |
Published: |
Razi Vaccine and Serum Research Institute
2014-05-01
|
Series: | Archives of Razi Institute |
Subjects: | |
Online Access: | http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103929_92f18f93e1f3429dd0300f6bfb3c14bd.pdf |
id |
doaj-602039747a084643a19b42c6297a5cb0 |
---|---|
record_format |
Article |
spelling |
doaj-602039747a084643a19b42c6297a5cb02020-11-24T21:22:15Zeng Razi Vaccine and Serum Research InstituteArchives of Razi Institute 0365-34392008-98722014-05-01691152010.7508/ari.2014.01.002103929کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلیاحمد رضا جباریسهیلا مرادی بیدهندیپژواک خاکیرضا پیله چیان لنگرودیزهرا بزرگخومحسن موسوی شوشتریکلستریدیوم سپتیکوم یک باکتری گرم مثبت بی هوازی است که تعدادی توکسین از جمله آلفا، بتا، گاما و دلتا را تولید می کند. آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم کشنده بوده و مسئول بیماری بسیار خطرناک قانقرایای گازی است. هدف مطالعه حاضر کلونینگ ملکولی و توالی یابی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسینال(CN913) است. از سوسپانسیون کشت شبانه باکتری، DNA ژنومیک به وسیله روش استاندارد فنل کلروفرم تخلیص و ژن آلفا توکسین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده و به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر شد. کمّیت و کیفیت محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از الکتروفورز ژل آگارز تعیین و به روش اسپکتروفوتومتری تائید گردید. محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز تخلیص ودر وکتورکلونینگ pJET1.2blunt لایگیت شد. سپس سلول مستعد E. coli/TOP10 به وسیله آن ترانسفورم گردید. پلاسمید نوترکیب pJETαsep از کلونE. coli/TOP10/pJETαsep تخلیص و ژن آلفا توکیسن به وسیلۀ پرایمرهای یونیورسال توالی یابی شد. توالی یابی و آنالیز بلاست ژن csa بیش از 99% تشابه را با سایر ژنهای csa موجود در بانک ژن نشان داد. این توالی با شماره JN793989 در بانک ژن ثبت گردید. از سویه E. coli/TOP10/pJETαsep می توان به عنوان یک کلون نوترکیب باکتریائی برای تخلیص ژن csa و بیان آن در میزبان مناسب استفاده نمود.http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103929_92f18f93e1f3429dd0300f6bfb3c14bd.pdfکلستریدیوم سپتیکومسویه واکسنژن آلفا توکسین(csa)کلونینگتوالی یابی |
collection |
DOAJ |
language |
English |
format |
Article |
sources |
DOAJ |
author |
احمد رضا جباری سهیلا مرادی بیدهندی پژواک خاکی رضا پیله چیان لنگرودی زهرا بزرگخو محسن موسوی شوشتری |
spellingShingle |
احمد رضا جباری سهیلا مرادی بیدهندی پژواک خاکی رضا پیله چیان لنگرودی زهرا بزرگخو محسن موسوی شوشتری کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی Archives of Razi Institute کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن ژن آلفا توکسین(csa) کلونینگ توالی یابی |
author_facet |
احمد رضا جباری سهیلا مرادی بیدهندی پژواک خاکی رضا پیله چیان لنگرودی زهرا بزرگخو محسن موسوی شوشتری |
author_sort |
احمد رضا جباری |
title |
کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی |
title_short |
کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی |
title_full |
کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی |
title_fullStr |
کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی |
title_full_unstemmed |
کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی |
title_sort |
کلونینگ ملکولی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن در اشریشیا کلی |
publisher |
Razi Vaccine and Serum Research Institute |
series |
Archives of Razi Institute |
issn |
0365-3439 2008-9872 |
publishDate |
2014-05-01 |
description |
کلستریدیوم سپتیکوم یک باکتری گرم مثبت بی هوازی است که تعدادی توکسین از جمله آلفا، بتا، گاما و دلتا را تولید می کند. آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم کشنده بوده و مسئول بیماری بسیار خطرناک قانقرایای گازی است. هدف مطالعه حاضر کلونینگ ملکولی و توالی یابی ژن آلفا توکسین کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسینال(CN913) است. از سوسپانسیون کشت شبانه باکتری، DNA ژنومیک به وسیله روش استاندارد فنل کلروفرم تخلیص و ژن آلفا توکسین با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده و به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر شد. کمّیت و کیفیت محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از الکتروفورز ژل آگارز تعیین و به روش اسپکتروفوتومتری تائید گردید. محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز تخلیص ودر وکتورکلونینگ pJET1.2blunt لایگیت شد. سپس سلول مستعد E. coli/TOP10 به وسیله آن ترانسفورم گردید. پلاسمید نوترکیب pJETαsep از کلونE. coli/TOP10/pJETαsep تخلیص و ژن آلفا توکیسن به وسیلۀ پرایمرهای یونیورسال توالی یابی شد. توالی یابی و آنالیز بلاست ژن csa بیش از 99% تشابه را با سایر ژنهای csa موجود در بانک ژن نشان داد. این توالی با شماره JN793989 در بانک ژن ثبت گردید. از سویه E. coli/TOP10/pJETαsep می توان به عنوان یک کلون نوترکیب باکتریائی برای تخلیص ژن csa و بیان آن در میزبان مناسب استفاده نمود. |
topic |
کلستریدیوم سپتیکوم سویه واکسن ژن آلفا توکسین(csa) کلونینگ توالی یابی |
url |
http://archrazi.areeo.ac.ir/article_103929_92f18f93e1f3429dd0300f6bfb3c14bd.pdf |
work_keys_str_mv |
AT ạḥmdrḍạjbạry ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly AT shylạmrạdybydhndy ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly AT pzẖwạḵkẖạḵy ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly AT rḍạpylhcẖyạnlngrwdy ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly AT zhrạbzrgkẖw ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly AT mḥsnmwswysẖwsẖtry ḵlwnyngmlḵwlyzẖnậlfạtwḵsynḵlstrydywmsptyḵwmswyhwạḵsndrạsẖrysẖyạḵly |
_version_ |
1725996650882662400 |