Técnica inmunocitoquímica para evaluar la proliferación de células en cultivo por la incorporación de romodeoxiuridina

• Main Authors: Sonia Rahiran, Zayra Garavito, Hernán Hurtado
• Format: Article
• Language: English
• Published: Instituto Nacional de Salud 2000-06-01
• Series: Biomédica: revista del Instituto Nacional de Salud
• Subjects: inmunocyitochemistry; bromodeoxiuridine; cell culture; Schwann cells; cellular proliferation
• Online Access: http://www.revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/1057

Para evaluar la proliferacion in vitro de células, se estandarizó una técnica inmunocitoquimica no radioactiva. fácil de manejar, más rápida y segura que permite detectar la bromodeoxiuridina (BrdU) incorporada en las células que entran en fase S. Durante la estandarización de la técnica inmunocitoquimica con peroxidasa, se usaron varios tipos celulares y se obtuvieron resultados similares. Brevemente, se realiza una incubación con BrdU durante 48 horas y luego, se procesa el material celular para una inmunocitoquimica convencional que tiene como paso adicional la desnaturalización del ADN con HCI previa a la incubación con el anticuerpo primario anti-BrdU. Como cromógeno se usó la DAB (diaminobenzidina) o el AEC (aminoetilcarbazol). El procedimiento utilizado permite ver una tinción especifica para núcleos en células que entran en fase S y permite evaluar rápidamente el porcentaje de células que están proliferando en el cultivo.