Studying possible regeneration of cabbage (Brassica juncea) and initial gene conversion based on Argobacter

• Main Authors: Nguyễn Lê Tú Trâm, Thái Hữu Phú, Nguyễn Văn Uyển
• Format: Article
• Language: English
• Published: HO CHI MINH CITY OPEN UNIVERSITY JOURNAL OF SCIENCE 2010-07-01
• Series: Tạp chí Khoa học Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh - Kỹ thuật và Công nghệ
• Subjects: lá mầm; trụ mầm; tái sinh; chuyển gene; thấm hút chân không
• Online Access: https://journalofscience.ou.edu.vn/index.php/tech-vi/article/view/1475

Lá mầm và trụ mâm từ cây cải xanh in vitro 7 ngày tuổi được gây nhiễm khuẩn Agrobacterium tumefaciens bằng máy hút chân không. Ở môi trường Murashige-Skoog (MS) có bổ sung benzyladenin (BA) 1 mg/1, naphthalene acetic acid (NAA) 1 mg/l và AgNO3 4 mg/l cho tỷ lệ chồi tái sinh cao nhất (95%) ở lá mầm; trong khi đó, ở trụ mầm, môi trường có bổ sung 2 mg/1 BA và 0,5 mg/1 NAA cho tỷ lệ tái sinh chồi cao nhất (64,1%) . Môi trường dùng để chọn lọc cây chuyến gen có chứa phosphinothricin (PPT) 3mg/l. Vi khuẩn được sử dụng cho thí nghiệm này là chủng Agrobacterium tumefaciens EHA 105 chứa plasmid ITB2 mang gen cryIA(c), gen bar và gen gusA. Các chối tái sinh hình thành cây con và ra rễ được trên môi trường MS có chứa PPT 3mg/l, sau đó tiến hành kiểm tra các gen được chuyển vào cây con.