Effect of arachidonic acid supplementation and cyclooxygenase/lipoxygenase inhibition on the development of early bovine embryos Influência do ácido araquidónico e da inibição da ciclo-oxigenase ou lipo-oxigenase no desenvolvimento inicial de embriões bovinos

• Main Authors: Rosa Maria Pereira, Carla Cruz Marques, Maria da Conceição Baptista, Maria Irene Vasques, António Eduardo Horta
• Format: Article
• Language: English
• Published: Sociedade Brasileira de Zootecnia 2006-04-01
• Series: Revista Brasileira de Zootecnia
• Subjects: ácido araquidónico; embriões bovinos; granulosa; in vitro; arachidonic acid; bovine embryos
• Online Access: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1516-35982006000200012

The effect of arachidonic acid (AA) cascade on bovine embryo development in a granulosa cell co-culture system was studied. Arachidonic acid (100 µM) was supplemented from 1-cell to 8-16 cell block stage (first three days of co-culture) and from 1-cell to hatching. Specific cyclooxygenase (indomethacin, 28 µM) and lipoxygenase (nordihydroguaiaretic acid - NDGA, 28 µM) inhibitors were used from 1-cell to 8-16 cell block stage with AA. Embryo development was assessed by cleavage, day 7-day 8 and hatched embryo rates and by measuring growth rates through development stages found in days 7-10 of culture (day 0 = insemination day). Embryo quality was scored at day 8. A 6.5-10.4% increase on cleavage rate after AA supplementation was found. This AA supplementation from 1-cell to hatching delayed embryo growth rate beyond day 7 and a reduction on hatching rate was detected. When AA supplementation was restricted to the first three days of co-culture those negative effects were overcome. Also, indomethacin and NDGA prevented the positive effect of AA and induced a significant reduction on cleavage, respectively. NDGA further decreased day 7 embryo rate and quality. Results suggest that AA has a two-phase action on bovine embryos, promoting early development and impairing embryo growth from day 7 onwards and hatching rates. Both cyclooxygenase and lipoxygenase were found to be important pathways to promote cleavage.<br>Estudou-se a influência da cascata do ácido araquidónico (AA) no desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro em co-cultura com células da granulosa. Os embriões foram suplementados com AA (100 µM) desde o estádio de 1 célula até 8-16 células (primeiros três dias de co-cultura) ou até a eclosão. Introduziram-se inibidores específicos da ciclo-oxigenase (indometacina, 28 µM) e da lipo-oxigenase (ácido nordihidroguaiarético - NDGA, 28 µM), juntamente com o ácido araquidónico, desde o estádio de 1 célula até 8-16 células. O desenvolvimento embrionário foi avaliado pelas taxas de clivagem de embriões nos dias 7 e 8 (D0 = dia da inseminação) e eclodidos. Avaliou-se também a velocidade de crescimento dos embriões entre os dias 7 e 10 de cultura e a qualidade dos embriões no dia 8. A suplementação dos embriões com AA aumentou a taxa de clivagem (6,5 e 10,4%). Por outro lado, a presença deste percursor das prostaglandinas e dos leucotrienos com os embriões desde o estádio de 1 célula até a eclosão atrasou sua velocidade de crescimento a partir do dia 7 e reduziu a taxa de eclosão em 20.4%. Estes efeitos negativos desapareceram quando a suplementação do AA foi restringida apenas aos três primeiros dias de co-cultura. A indometacina evitou o efeito positivo do AA na clivagem, tendo o NDGA reduzido esta taxa, mesmo em presença do AA, assim como a taxa de embriões em D7 e a qualidade dos embriões D8. Os resultados sugerem que o ácido araquidónico tem efeito bifásico nos embriões bovinos, promovendo o início do seu desenvolvimento e, após D7, diminuindo as taxas de crescimento e eclosão. Ambas as vias metabólicas da ciclo-oxigenase e lipo-oxigenase parecem importantes na clivagem.