Expresión episomal de toxina de pertussis genéticamente inactivada en Bordetella pertussis

• Main Authors: Ernesto Marcos, Karen Marrero, Edith Suzarte, Lourdes L. Proenza, Beatriz Ferrán, Celso Pérez, Javier Campos
• Format: Article
• Language: English
• Published: Centro Nacional de Investigaciones Científicas 2010-01-01
• Series: Revista CENIC. Ciencias Biológicas
• Online Access: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=181220595005
• ISSN: 0253-5688; 2221-2450

Bordetella pertussis es una bacteria Gram negativa, la cual constituye el agente etiologico de la tos ferina. La enfermedad se desencadena por el efecto conjunto de una serie de factores de virulencia expresados por la bacteria, los cuales se encuentran regulados por el sistema bvg. Uno de los factores de virulencia mas importantes es la toxina de pertussis, razon por la cual, se emplea de forma inactivada como el componente principal de las vacunas acelulares contra la enfermedad. La toxina de pertussis posee una estructura del tipo A-B compuesta por seis polipeptidos codificados en un operon unico. El polipeptido S1 constituye la subunidad enzimaticamente activa, la cual cataliza la transferencia de ADP-ribosa del NAD a la subunidad ALPHA de las proteinas G en celulas eucariotas, lo cual genera una serie de efectos biologicos dentro de los que se incluye: sensibilizacion a histamina, incremento de la secrecion de insulina y efectos inmunoestimuladores e inmunosupresores. El presente trabajo describe los procedimientos realizados para la obtencion de cepas de Bordetella pertussis productoras de elevadas concentraciones de toxina pertusica atenuada geneticamente. Para esto, se realizaron las sustituciones aminoacidicas Arg9 por Lys y Glu129 por Gly de la subunidad S1. El operon de la toxina de pertussis mutada se clono en un vector de amplio rango de hospedero bajo la regulacion de un promotor de expresion temprana (fhaB). Los clones obtenidos pudieran ser empleados como sistemas de expresion para produccion de vacunas acelulares en Cuba.