آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coli
از آنجا که تعداد زیادی از جمعیت جهان به صورت نهفته با باسیل سل (Mycobacterium tuberculosis) آلوده هستند، واکسن هایی که سل نهفته را مورد هدف قرار بدهند تاثیر قابل توجهی در کنترل شیوع جهانی سل خواهند داشت. در این پژوهش ابتدا آنالیزهای بیوانفورماتیک روی یک پروتئین مایکوباکتریایی مربوط به فاز نهفته عفون...
| Main Authors: | , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | fas |
| Published: |
Alzahra University
2018-05-01
|
| Series: | زیست‌شناسی کاربردی |
| Subjects: | |
| Online Access: | http://jab.alzahra.ac.ir/article_3702_6b762df35279ac33a420af6accf20083.pdf |
| id |
doaj-1fbcb5daebb145e5a1e88dea75c568f1 |
|---|---|
| record_format |
Article |
| spelling |
doaj-1fbcb5daebb145e5a1e88dea75c568f12020-11-25T00:05:04ZfasAlzahra Universityزیست‌شناسی کاربردی2251-79012538-21872018-05-0131117818910.22051/jab.2017.13989.11283702آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coliمیترا عشایری پناه0فرشته افتخار1بهرام کاظمی2محمد مهدی فیض آبادی3گروه میکروبیولوژی دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه شهید بهشتیدانشیار،گروه میکروبیولوژی دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه شهید بهشتیاستاد گروه بیوتکنولوژی دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتیاستاد گروه میکروب شناسی دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهراناز آنجا که تعداد زیادی از جمعیت جهان به صورت نهفته با باسیل سل (Mycobacterium tuberculosis) آلوده هستند، واکسن هایی که سل نهفته را مورد هدف قرار بدهند تاثیر قابل توجهی در کنترل شیوع جهانی سل خواهند داشت. در این پژوهش ابتدا آنالیزهای بیوانفورماتیک روی یک پروتئین مایکوباکتریایی مربوط به فاز نهفته عفونت به نام Rv1733c انجام شد و پیش بینی شد که Rv1733c یک پروتئین غشایی با تعداد زیادی اپیتوپ های سلول B و T است که آن را کاندیدی مناسبی برای تولید واکسن می سازد. سپس، ژن rv1733c از H37Rv M. tuberculosis به صورت شیمیایی سنتز شد، در پلاسمید pTG19-T قرار داده شد و پلاسمید نوترکیب حاصل به E. coli Top10 ترنسفورم شد. پس از تایید توسط برش آنزیمی و توالی یابی، قطعه DNA مورد نظر به پلاسمید pET23a(+) منتقل و در (E. coli BL21 (DE3 بیان شد. پروتئین بیان شده بصورت باندی با وزن ملکولی تقریبی kDa 24 در ژل SDS-PAGE مشاهده شدکه توسط آنتی بادی علیه دنباله هیستیدینی آن، باندی با اندازه مشابه در آنالیز وسترن بلات آشکار شد. در نهایت خالص سازی پروتئین با استفاده از یک کیت کروماتوگرافی تمایلی برای دنباله هیستیدینی صورت پذیرفت.http://jab.alzahra.ac.ir/article_3702_6b762df35279ac33a420af6accf20083.pdfRv1733cMycobacterium tuberculosisEscherichia coliهمسانه سازی و بیانتخلیص پروتئین |
| collection |
DOAJ |
| language |
fas |
| format |
Article |
| sources |
DOAJ |
| author |
میترا عشایری پناه فرشته افتخار بهرام کاظمی محمد مهدی فیض آبادی |
| spellingShingle |
میترا عشایری پناه فرشته افتخار بهرام کاظمی محمد مهدی فیض آبادی آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coli زیست‌شناسی کاربردی Rv1733c Mycobacterium tuberculosis Escherichia coli همسانه سازی و بیان تخلیص پروتئین |
| author_facet |
میترا عشایری پناه فرشته افتخار بهرام کاظمی محمد مهدی فیض آبادی |
| author_sort |
میترا عشایری پناه |
| title |
آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coli |
| title_short |
آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coli |
| title_full |
آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coli |
| title_fullStr |
آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coli |
| title_full_unstemmed |
آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی Rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در Escherichia coli |
| title_sort |
آنالیز بیوانفورماتیکی پروتئین مایکوباکتریایی rv1733c بعنوان کاندیدای واکسن، همسانه سازی و بیان آن در escherichia coli |
| publisher |
Alzahra University |
| series |
زیست‌شناسی کاربردی |
| issn |
2251-7901 2538-2187 |
| publishDate |
2018-05-01 |
| description |
از آنجا که تعداد زیادی از جمعیت جهان به صورت نهفته با باسیل سل (Mycobacterium tuberculosis) آلوده هستند، واکسن هایی که سل نهفته را مورد هدف قرار بدهند تاثیر قابل توجهی در کنترل شیوع جهانی سل خواهند داشت. در این پژوهش ابتدا آنالیزهای بیوانفورماتیک روی یک پروتئین مایکوباکتریایی مربوط به فاز نهفته عفونت به نام Rv1733c انجام شد و پیش بینی شد که Rv1733c یک پروتئین غشایی با تعداد زیادی اپیتوپ های سلول B و T است که آن را کاندیدی مناسبی برای تولید واکسن می سازد. سپس، ژن rv1733c از H37Rv M. tuberculosis به صورت شیمیایی سنتز شد، در پلاسمید pTG19-T قرار داده شد و پلاسمید نوترکیب حاصل به E. coli Top10 ترنسفورم شد. پس از تایید توسط برش آنزیمی و توالی یابی، قطعه DNA مورد نظر به پلاسمید pET23a(+) منتقل و در (E. coli BL21 (DE3 بیان شد. پروتئین بیان شده بصورت باندی با وزن ملکولی تقریبی kDa 24 در ژل SDS-PAGE مشاهده شدکه توسط آنتی بادی علیه دنباله هیستیدینی آن، باندی با اندازه مشابه در آنالیز وسترن بلات آشکار شد. در نهایت خالص سازی پروتئین با استفاده از یک کیت کروماتوگرافی تمایلی برای دنباله هیستیدینی صورت پذیرفت. |
| topic |
Rv1733c Mycobacterium tuberculosis Escherichia coli همسانه سازی و بیان تخلیص پروتئین |
| url |
http://jab.alzahra.ac.ir/article_3702_6b762df35279ac33a420af6accf20083.pdf |
| work_keys_str_mv |
AT mytrạʿsẖạyrypnạh ậnạlyzbywạnfwrmạtyḵyprwtỷynmạyḵwbạḵtryạyyrv1733cbʿnwạnḵạndydạywạḵsnhmsạnhsạzywbyạnậndrescherichiacoli AT frsẖthạftkẖạr ậnạlyzbywạnfwrmạtyḵyprwtỷynmạyḵwbạḵtryạyyrv1733cbʿnwạnḵạndydạywạḵsnhmsạnhsạzywbyạnậndrescherichiacoli AT bhrạmḵạẓmy ậnạlyzbywạnfwrmạtyḵyprwtỷynmạyḵwbạḵtryạyyrv1733cbʿnwạnḵạndydạywạḵsnhmsạnhsạzywbyạnậndrescherichiacoli AT mḥmdmhdyfyḍậbạdy ậnạlyzbywạnfwrmạtyḵyprwtỷynmạyḵwbạḵtryạyyrv1733cbʿnwạnḵạndydạywạḵsnhmsạnhsạzywbyạnậndrescherichiacoli |
| _version_ |
1725426462256791552 |