Padronização da PCR em tempo real para a genotipagem de HPV 6-11, HPV 16 e HPV 18 utilizando controle interno

• Main Authors: João Pedro Bernardy, Nayanna Dias Bierhals, Lia Gonçalves Possuelo, Jane Dagmar Pollo Renner
• Format: Article
• Language: Portuguese
• Published: Universidade de Santa Cruz do Sul 2018-07-01
• Series: Revista Jovens Pesquisadores
• Subjects: HPV. Câncer de colo de útero. PCR em tempo real.
• Online Access: https://online.unisc.br/seer/index.php/jovenspesquisadores/article/view/12090

O Papilomavírus humano (HPV) é um dos agentes etiológicos mais comuns das infecções sexualmente transmissíveis. Os tipos de alto risco oncogênico têm relação com o desenvolvimento das neoplasias intra-epiteliais e do câncer invasor do colo uterino, da vulva, da vagina e da região anal. Neste contexto, o objetivo desse estudo foi padronizar a técnica de Reação de Polimerase em Cadeia em tempo real (RT-PCR) para diagnóstico de HPV e genotipar os HPV 6-11, 16 e 18 em amostras cérvico-vaginais de mulheres atendidas pelo Serviço Integrado de Saúde (SIS) da Universidade de Santa Cruz do Sul. Foi realizado um estudo transversal, em que a coleta de amostras foi efetivada no período de fevereiro a maio de 2015 com mulheres que realizaram a coleta de Papanicolau. As amostras foram analisadas pelo método de RT-PCR utilizando fluorescência por SYBR Green. Para presença do HPV foram utilizados primers consenso e para a detecção dos genótipos de HPV-06/11, 16 e 18 foram utilizados primers específicos. A β-globina foi utilizada como controle interno. Foram padronizadas as técnicas de RT-PCR para diagnóstico e genotipagem com controle interno e testadas em 99 amostras cérvico-vaginais. As amostras testadas foram negativas para HPV utilizando a técnica padronizada. Concluiu-se que foi possível padronizar a técnica de RT-PCR para diagnóstico HPV e genotipagem de HPV-16 com controle interno.